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dd812007135木蟲(chóng) (正式寫手)
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細(xì)胞培養(yǎng)后形態(tài)變得不太規(guī)則的因素
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HEla細(xì)胞經(jīng)傳代后,經(jīng)12小時(shí)的培養(yǎng)后,觀察有大量的圓亮點(diǎn),以及細(xì)胞形態(tài)也變得不太規(guī)則,又不是污染的癥狀,高手們,請(qǐng)問(wèn)是不是我操作上有什么問(wèn)題? 1.吸除舊培養(yǎng)液,加入5MLPBS洗滌,重復(fù)一次。 2。加入1.5ML胰酶消化1分鐘。 3。吸掉胰酶,加入5ML新鮮培養(yǎng)液,吹打(吹打時(shí)不知老是會(huì)有氣泡) 4.移入離心管離心5分鐘,倒掉上清液,加入1ML培養(yǎng)液,吹打。 5.在新培養(yǎng)瓶中加入5ml培養(yǎng)液,接入300ul細(xì)胞液。 6.放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 |
木蟲(chóng) (正式寫手)
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鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)
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你加了胰酶不用血清終止的么?還是你的培養(yǎng)基里已經(jīng)加好?吹打的時(shí)候最好不要起泡,對(duì)細(xì)胞的損傷還是比較大的,胰酶消化得好的話應(yīng)該輕輕一吹就掉了。你說(shuō)的十二小時(shí)的情況可能是由于部分細(xì)胞已經(jīng)貼壁延伸,有的剛貼沒(méi)延伸依舊處于圓形 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |

鐵蟲(chóng) (正式寫手)
細(xì)胞變圓應(yīng)該是老化的原因,傳代次數(shù)多了有變圓的細(xì)胞出現(xiàn)屬正,F(xiàn)象。細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則的問(wèn)題,我培養(yǎng)的細(xì)胞也出現(xiàn)過(guò),你往培養(yǎng)液里加點(diǎn)谷氨酰胺看看,谷氨酰胺在培養(yǎng)液中很不穩(wěn)定,容易降解,需要一段時(shí)間后補(bǔ)加,具體配方你可以查一下,如有需要我也可以告訴你~ 我在往培養(yǎng)液中加了谷氨酰胺后細(xì)胞的狀態(tài)明顯有好轉(zhuǎn),現(xiàn)在長(zhǎng)得很好。祝實(shí)驗(yàn)順利! |
木蟲(chóng) (正式寫手)
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