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天鳥木蟲 (正式寫手)
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[求助]
連接轉(zhuǎn)化出現(xiàn)很多微小的菌落 已有1人參與
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| 首先我的PCR產(chǎn)物經(jīng)過純化,純化DNA的圖還是比較亮的。我連接的片段是400BP ,我連接的體系是:4微升DNA,1微升載體19-t,和solution I 5微升,在16度連接了3小時,圖AMP+的平板后培養(yǎng)12小時發(fā)現(xiàn)菌落的大小不一致,大的菌旁邊很多很小的菌落,菌落PCR驗證發(fā)現(xiàn)陽性率只有50-70%,而且挑菌的時候也很不順利,我挑的相對大些的菌落時,旁邊就有小菌落。我這個重復(fù)做了兩次,結(jié)果都差不多。平板也做了兩批,也沒有區(qū)別 |

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