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紫外分光光度儀繪制標準磷曲線
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使用磷酸二氫鉀、硫酸、鉬酸銨及抗壞血酸為原料,使用紫外分光光度計繪制標準磷曲線。問:(1)空白測試是使用水還是硫酸、鉬酸銨、抗壞血酸和水的混合溶液? (2)以混合溶液為空白對照,對其它含磷溶液進行全波段掃描(190~800nm),為什么在321nm左右處出現(xiàn)峰值,而文獻中使用的是690nm,690nm是如何確定的呢? (3)如果進行標準曲線繪制,含磷量大概為多少?實驗中我使用的是1ug/ml,不知是不是濃度過低?影響最終結果么? |
木蟲 (正式寫手)

金蟲 (小有名氣)

鐵蟲 (小有名氣)

銅蟲 (初入文壇)
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樓主你好!測磷有 磷釩鉬黃光光度法 和磷鉬藍光度法兩種,前一種在420nm波長下測量,后一種在700nm 也就是你說的690nm附近測量。我想你應該是選用的 磷鉬藍光度法 。 首先,給你方法提要:磷鉬藍光度法,在1.0-1.4mol/L鹽酸介質中,酒石酸鉀鈉存在下,以乙醇為穩(wěn)定劑,加入鉬酸銨使磷酸根例子生成磷鉬雜多酸,在用抗壞血酸將磷鉬雜多酸還原為磷鉬藍,于波長700nm處進行P的測量。 其次,建議標準液ρP2O5=10ug/ml,曲線:0.00 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 7.50 10.00ml 于50.00ml的比色管加入10ml(1+1)鹽酸,1ml酒石酸鉀鈉400g/L,5ml鉬酸銨50g/L,5ml乙醇用水稀釋至30ml左右,每加一次試劑均需搖勻。然后,沸水浴5min,取下立即加入5ml抗壞血酸50g/L,搖勻。放置5-10min再上機掃描試試。 最后,空白用的是沒加標準試劑的混合液。濃度比較低的話,盡量選擇3cm 的比色皿。 |
銅蟲 (初入文壇)
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