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紫外分光光度儀繪制標(biāo)準(zhǔn)磷曲線
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使用磷酸二氫鉀、硫酸、鉬酸銨及抗壞血酸為原料，使用紫外分光光度計(jì)繪制標(biāo)準(zhǔn)磷曲線。問：（1）空白測(cè)試是使用水還是硫酸、鉬酸銨、抗壞血酸和水的混合溶液？ （2）以混合溶液為空白對(duì)照，對(duì)其它含磷溶液進(jìn)行全波段掃描（190~800nm），為什么在321nm左右處出現(xiàn)峰值，而文獻(xiàn)中使用的是690nm，690nm是如何確定的呢？ （3）如果進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，含磷量大概為多少？實(shí)驗(yàn)中我使用的是1ug/ml，不知是不是濃度過低？影響最終結(jié)果么？ |
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徐丁
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4樓2012-04-07 11:35:20
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樓主你好！測(cè)磷有 磷釩鉬黃光光度法 和磷鉬藍(lán)光度法兩種，前一種在420nm波長(zhǎng)下測(cè)量，后一種在700nm 也就是你說的690nm附近測(cè)量。我想你應(yīng)該是選用的 磷鉬藍(lán)光度法 。 首先，給你方法提要：磷鉬藍(lán)光度法，在1.0-1.4mol/L鹽酸介質(zhì)中，酒石酸鉀鈉存在下，以乙醇為穩(wěn)定劑，加入鉬酸銨使磷酸根例子生成磷鉬雜多酸，在用抗壞血酸將磷鉬雜多酸還原為磷鉬藍(lán)，于波長(zhǎng)700nm處進(jìn)行P的測(cè)量。 其次，建議標(biāo)準(zhǔn)液ρP2O5=10ug/ml，曲線：0.00 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 7.50 10.00ml 于50.00ml的比色管加入10ml（1+1）鹽酸，1ml酒石酸鉀鈉400g/L，5ml鉬酸銨50g/L，5ml乙醇用水稀釋至30ml左右，每加一次試劑均需搖勻。然后，沸水浴5min，取下立即加入5ml抗壞血酸50g/L，搖勻。放置5-10min再上機(jī)掃描試試。 最后，空白用的是沒加標(biāo)準(zhǔn)試劑的混合液。濃度比較低的話，盡量選擇3cm 的比色皿。 |
5樓2012-05-13 02:55:24
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