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紫外分光光度儀繪制標準磷曲線
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使用磷酸二氫鉀、硫酸、鉬酸銨及抗壞血酸為原料，使用紫外分光光度計繪制標準磷曲線。問：（1）空白測試是使用水還是硫酸、鉬酸銨、抗壞血酸和水的混合溶液？ （2）以混合溶液為空白對照，對其它含磷溶液進行全波段掃描（190~800nm），為什么在321nm左右處出現(xiàn)峰值，而文獻中使用的是690nm，690nm是如何確定的呢？ （3）如果進行標準曲線繪制，含磷量大概為多少？實驗中我使用的是1ug/ml，不知是不是濃度過低？影響最終結(jié)果么？ |
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luoyang8780
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3樓2012-04-06 21:17:24
wsp1988
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徐丁
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4樓2012-04-07 11:35:20
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樓主你好！測磷有 磷釩鉬黃光光度法 和磷鉬藍光度法兩種，前一種在420nm波長下測量，后一種在700nm 也就是你說的690nm附近測量。我想你應該是選用的 磷鉬藍光度法 。 首先，給你方法提要：磷鉬藍光度法，在1.0-1.4mol/L鹽酸介質(zhì)中，酒石酸鉀鈉存在下，以乙醇為穩(wěn)定劑，加入鉬酸銨使磷酸根例子生成磷鉬雜多酸，在用抗壞血酸將磷鉬雜多酸還原為磷鉬藍，于波長700nm處進行P的測量。 其次，建議標準液ρP2O5=10ug/ml，曲線：0.00 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 7.50 10.00ml 于50.00ml的比色管加入10ml（1+1）鹽酸，1ml酒石酸鉀鈉400g/L，5ml鉬酸銨50g/L，5ml乙醇用水稀釋至30ml左右，每加一次試劑均需搖勻。然后，沸水浴5min，取下立即加入5ml抗壞血酸50g/L，搖勻。放置5-10min再上機掃描試試。 最后，空白用的是沒加標準試劑的混合液。濃度比較低的話，盡量選擇3cm 的比色皿。 |
5樓2012-05-13 02:55:24
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