 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 8606 | 回復(fù): 10 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
weandyouzhy木蟲 (小有名氣)
|
[求助]
PCR的引物擴(kuò)增后會(huì)被降解掉嗎？
|
||
一般的DNA復(fù)制完成時(shí)，RNA引物會(huì)被降解掉。那么在pcr擴(kuò)增反應(yīng)中。Taq酶會(huì)不會(huì)將引物鏈剪切掉呢？另外，能不能詳細(xì)的介紹下PCR中所加試劑的量的原因。謝謝了 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有214人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 求助：PCR擴(kuò)增片段測(cè)序結(jié)果引物中間多出150bp的片段
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 細(xì)菌引物 338F 518R 做DGGE之后 pcr
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 幫忙評(píng)價(jià)一下PCR引物
已經(jīng)有11人回復(fù)
- PCR過(guò)程中加入的引物的量是不是至少和最后雙鏈產(chǎn)物一樣多？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 兼并引物PCR連T載體后，怎么鑒定有沒(méi)有連上
已經(jīng)有20人回復(fù)
- PCR引物擴(kuò)增的問(wèn)題
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 如何設(shè)計(jì)重疊延伸PCR引物
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】求PCR二次擴(kuò)增引物
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR引物二聚體問(wèn)題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】為什么PCR引物不能反復(fù)凍融？后果會(huì)是怎樣
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】pCR引物設(shè)計(jì)的詳細(xì)規(guī)則
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR引物設(shè)計(jì)出來(lái)了，但酶切之后電泳沒(méi)條帶啊
已經(jīng)有18人回復(fù)
9樓2012-04-09 16:21:23
zhaohq1209
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 5
- 應(yīng)助: 41 (小學(xué)生)
- 貴賓: 0.034
- 金幣: 10666.7
- 散金: 587
- 紅花: 12
- 帖子: 2113
- 在線: 333.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 243823
- 注冊(cè): 2006-04-15
- 專業(yè): 病原細(xì)菌、細(xì)菌感染與宿主
2樓2012-04-07 14:40:48
bbwalkman
木蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 6
- 應(yīng)助: 43 (小學(xué)生)
- 金幣: 2334.5
- 紅花: 3
- 帖子: 240
- 在線: 171.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 1279904
- 注冊(cè): 2011-04-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
amisking: 金幣+5, MolEPI+1, 鼓勵(lì)幫助解答問(wèn)題！ 2012-04-07 19:03:00
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
amisking: 金幣+5, MolEPI+1, 鼓勵(lì)幫助解答問(wèn)題！ 2012-04-07 19:03:00
|
應(yīng)該是不會(huì)的，因?yàn)樵谀闩苣z的時(shí)候會(huì)發(fā)現(xiàn)在最頂端還是有引物條帶存在的，而且Taq酶均具有5'-3'聚合酶活性，但不一定具有3'-5'和5'-3'的外切酶活性。3'-5'外切酶活性可以消除錯(cuò)配，切平末端；5'-3'外切酶活性可以消除合成障礙。 PCR試劑中的量： 1.首先要看你的體系是多少ul，規(guī)劃好引物、模板、dNTP、酶和Buffer的量，其余用水補(bǔ)齊。 2.引物一般是要過(guò)量的，這樣才能保證PCR能夠在設(shè)定的循環(huán)里面跑完，一般濃度是uM。 3.模板一般就是ng級(jí)別的就可以了，主要是能保證前期引物可以與其結(jié)合。 4.dNTP的話一般都是mM級(jí)別的，它的濃度要比較大，保證反應(yīng)順利進(jìn)行。 5.酶的話說(shuō)明書上一般都會(huì)提到，按它的活性和單位來(lái)加就可以了。 6.Buffer要根據(jù)你的總體積，將儲(chǔ)備濃度換算成最終的1X的就可以了。 祝好運(yùn)！ |
3樓2012-04-07 14:56:00
imyting
至尊木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 6
- 應(yīng)助: 66 (初中生)
- 金幣: 10218.2
- 散金: 658
- 紅花: 5
- 帖子: 805
- 在線: 167.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 736362
- 注冊(cè): 2009-03-31
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
amisking: 金幣+5, 鼓勵(lì)幫助解答問(wèn)題！ 2012-04-07 19:03:09
weandyouzhy: 回帖置頂 2012-04-07 20:23:00
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
amisking: 金幣+5, 鼓勵(lì)幫助解答問(wèn)題！ 2012-04-07 19:03:09
weandyouzhy: 回帖置頂 2012-04-07 20:23:00
| 答案是否定的，Taq酶不具有水解引物的能力，不然的話PCR還如何繼續(xù)，或者是你如何控制Taq酶發(fā)揮作用？PCR條件中有考慮這方面的嗎？此外，在拿PCR產(chǎn)物跑膠時(shí)，有時(shí)能看到明顯的引物二聚體條帶，這也說(shuō)明引物不會(huì)被降解。PCR體系中各組分的量基本是圍繞酶和模板確定的，Buffer是10×的，當(dāng)然加總體積的十分之一了，Mg離子的濃度關(guān)系到Taq酶的活力也是確定的，引物的濃度只要達(dá)到一定程度就好了，過(guò)多會(huì)產(chǎn)生二聚體之類的，過(guò)少影響PCR反應(yīng)啟動(dòng)，模板也是的，多了也不好純化啊，酶的話一般都有推薦量的，一定的體積加上那么多的酶就能滿足要求了。而且酶的說(shuō)明書也沒(méi)有明確說(shuō)其活力如何，只是給出在一定條件下的PCR結(jié)果罷了，只是參考。 |
4樓2012-04-07 15:04:58
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +5 | 1428151015 2026-03-27 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 352分 化工與材料 +5 | 海納百川Ly 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑一志愿哈工大324 +5 | 閆旭東 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +10 | Micky11223 2026-03-25 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 張芳銘-中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)-環(huán)境工程專碩-298 +3 | 手機(jī)用戶 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +7 | 邱gl 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 279 分 求調(diào)劑 +4 | 睡個(gè)好覺(jué)_16 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 材料與化工考研調(diào)劑
+16
|
孅華 2026-03-22 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 求求了收下我吧?/a> 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑。有半年電池和半年高分子實(shí)習(xí)經(jīng)歷 +10 | 材料學(xué)257求調(diào)劑 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭州大學(xué)，080500學(xué)碩，總分317分求調(diào)劑 +4 | 舉個(gè)栗子oi 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +6 | wfh030413@ 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué) 296 求調(diào)劑 +4 | 朵朵- 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +3 | Amber00 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +6 | 紅衣隱官 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +8 | zhn03 2026-03-25 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +3 | AZMK 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考博] 26申博自薦 +3 | whh869393 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +4 | LHHL66 2026-03-23 | 4/200 |
|