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danyzj01銀蟲 (正式寫手)
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提取DNA的時候，為什么要用醋酸鉀，用醋酸鈉代替或者醋酸鉀+氯化鉀是否可行？
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| 醋酸鉀的作用是什么，僅僅是提供鉀離子嗎，提供的鉀離子發(fā)揮什么作用呢？ |
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atlanticwi
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我們提取植物gDNA，一般采取CTAB法，文獻(xiàn)中本來就有改進(jìn)過多個的版本，我們采取合適的版本，至今沿用下來，沒有改過 提取RNA時，采用TRIzol法，我自個按照文獻(xiàn)方案進(jìn)行了20+以上的提取，發(fā)現(xiàn)一直存在有A260/230比值過低的問題，最后根據(jù)手頭資料改進(jìn)后續(xù)步驟后，繼續(xù)試驗5+以上次數(shù)后確定有效，才做自行修訂方案的。 國外有影響的雜志對實(shí)驗的重復(fù)性要求很高，所以對實(shí)驗方案的描述要求都是嚴(yán)之又嚴(yán)，采用這類雜志的方案普遍都是沒有問題的，若有改進(jìn)也是在重復(fù)多次發(fā)現(xiàn)問題反復(fù)出現(xiàn)后才思考改進(jìn)的。 |
6樓2012-04-11 23:04:23
atlanticwi
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嗯................. 你指的是核酸共沉劑嗎，我一般用NaAc，NaCl，KAc木有用過，不過按照共沉劑的作用是提供一價陽離子中和DNA的負(fù)電荷，從而中和DNA分子間排斥作用，以達(dá)到共沉淀的效果來看，K離子也是可以用的，但具體沒有應(yīng)用過，不敢亂說 個人看法，若有說錯請高手指正  |
2樓2012-04-11 14:06:05
danyzj01
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4樓2012-04-11 21:40:10
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