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jamy1989木蟲 (小有名氣)
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[求助]
透析后蛋白沉淀
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我的目的蛋白在用8M尿素溶解后透析復(fù)性，透析完后全部沉淀了，跑膠什么都沒(méi)有！我透析的步驟是： 1、4M尿素 0.1M Tris-Hcl 0.4M L-Arg 1mM EDTA 0.2mM PMSF 5%甘油 PH=8 2、1M尿素 0.1M Tris-Hcl 0.4M L-Arg 1mM EDTA 0.2mM PMSF 5%甘油 PH=8 3、binding buffer 20mM磷酸鈉 500mM氯化鈉 5mM咪唑 PH=7.6 各位看看問(wèn)題出在哪里呢？我每步在4度冰箱透析了24個(gè)小時(shí)！是不是我的蛋白濃度太大了呢？還是我透析的步驟太少��？或者其它什么原因？急呀？？？ |
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zc10052157
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