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fly12365銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
T4l連接問題��！
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目前，T4連接遇到問題，老連不上，體系如下： T4 1μL PBI101-GFP 2μL(濃度10ng/μL) 片段 6μL(濃度50ng/μL) 10x Buffer 1μL 12℃ 過夜，感受態(tài)JM109 正常， 請大蝦們幫助，卡在這了，五個基因一個也沒構(gòu)成，急死了��！ Sample Text |
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sayaya
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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9樓2012-05-03 10:19:26
atlanticwi
金蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
fly12365: 金幣+3, ★有幫助 2012-05-01 08:53:59
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵應(yīng)助 2012-05-02 13:36:49
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嗯............ 最好先驗證下T4是否還好，T4的Buffer中含有的ATP很容易在凍融過程中降解導(dǎo)致連接失敗，所以T4的Buffer都是推薦分裝使用，并且在冰上化融的，請樓主注意哦 你可以先拿個已知質(zhì)粒做酶切后，用T4連接看是否可行，若能夠連接的話，問題就不是你的T4上咯，應(yīng)該是你的片段切口和質(zhì)粒切口對不上的 祝實驗順利 若有說錯請高手指點哦  |
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fly12365
2樓2012-04-30 23:40:03
快樂由自己go
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2012-05-01 03:34:46
fly12365
銅蟲 (初入文壇)
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4樓2012-05-01 08:38:11
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