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wushuwei1104銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于質(zhì)粒載體的純化
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這些天在做質(zhì)粒的酶切與連接 將目的基因片段雙酶切，載體質(zhì)粒雙酶切（37℃水浴2.5小時(shí)）后，65℃水浴20分鐘終止酶切反應(yīng)，采用試劑盒純化雙酶切后的目的基因和載體質(zhì)粒，以便后續(xù)的連接實(shí)驗(yàn)。問(wèn)題是酶切完電泳驗(yàn)證目的基因和質(zhì)粒載體都還存在，可采用試劑盒純化后目的基因片段依然存在（濃度尚可，略有損失），可載體質(zhì)粒卻不見(jiàn)了。這兩個(gè)純化過(guò)程是同時(shí)進(jìn)行的，因?yàn)榕率遣僮鞒藛?wèn)題，又重新酶切純化電泳驗(yàn)證一下做了3次，3次都是一樣的效果，條帶不見(jiàn)了�。。。� 懇請(qǐng)各位大俠分析一下，您做實(shí)驗(yàn)時(shí)是否出現(xiàn)類似情況，為何會(huì)出現(xiàn)這種情況？ 謝謝了�。�！ |
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張宏宇123
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2樓2012-05-02 22:15:33
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wushuwei1104
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4樓2012-05-03 07:47:05
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