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qizongxian金蟲 (小有名氣)
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[求助]
高手指點(diǎn)一下蝸牛酶的除菌
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| 各位高手,小弟請(qǐng)教一個(gè)問(wèn)題啊,我們實(shí)驗(yàn)室買的蝸牛酶是粉末狀的,配成試劑形式之后需要過(guò)濾除菌,可是用0.45μm的濾膜過(guò)濾不了,拿去4℃離心,發(fā)現(xiàn)其有沉淀,這是怎么回事,各位是怎么除菌的? |
專家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗(yàn): +248 |
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粉末狀的可能是有兩種制備方法,一種是將酶純化之后凍干,但涉及到酶的重組表達(dá)和分離純化,工序較多,投入成本高,價(jià)格偏貴,而且純酶一般是液態(tài)產(chǎn)品,沒(méi)有必要制備成凍干粉。另一種是粗酶凍干,這樣的工序少,制備成本低,但粗酶可能含有一些雜質(zhì),在凍干之前的離心過(guò)膜步驟去除不了,但凍干之后再溶解就沉淀下來(lái)了;蛘叽置冈趦龈芍斑加了一些吸附劑來(lái)吸附,那么凍干之后再溶解產(chǎn)生的沉淀更多。 最直接的方法是測(cè)定溶解之后的酶活力比商品包裝上寫的損失了多少,但我覺(jué)得沒(méi)必要,損失就損失了,測(cè)了之后也不會(huì)重新變多。而且如果是用來(lái)破壁制備原生質(zhì)體的蝸牛酶沒(méi)必要很純,粗一點(diǎn)沒(méi)關(guān)系。 有沉淀就先離心再過(guò)膜,直接過(guò)0.45微米的膜肯定堵的。 我認(rèn)為有沉淀是正常的,也是可以接受的,最多也就下次買純酶,只要有錢。 |

金蟲 (小有名氣)

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