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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 高手指點一下蝸牛酶的除菌
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qizongxian金蟲 (小有名氣)
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[求助]
高手指點一下蝸牛酶的除菌
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| 各位高手，小弟請教一個問題啊，我們實驗室買的蝸牛酶是粉末狀的，配成試劑形式之后需要過濾除菌，可是用0.45μm的濾膜過濾不了，拿去4℃離心，發(fā)現(xiàn)其有沉淀，這是怎么回事，各位是怎么除菌的？ |
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【答案】應助回帖
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scelab: 回帖置頂 2012-05-04 11:32:38
scelab: 金幣+5, MicEPI+1, 謝謝熱心交流~ :) 2012-05-04 11:32:55
qizongxian: 金幣+5, ★★★很有幫助, 解答很給力�。∈指兄x！~ 2012-05-04 11:51:34
scelab: 回帖置頂 2012-05-04 11:32:38
scelab: 金幣+5, MicEPI+1, 謝謝熱心交流~ :) 2012-05-04 11:32:55
qizongxian: 金幣+5, ★★★很有幫助, 解答很給力�。∈指兄x！~ 2012-05-04 11:51:34
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粉末狀的可能是有兩種制備方法，一種是將酶純化之后凍干，但涉及到酶的重組表達和分離純化，工序較多，投入成本高，價格偏貴，而且純酶一般是液態(tài)產(chǎn)品，沒有必要制備成凍干粉。另一種是粗酶凍干，這樣的工序少，制備成本低，但粗酶可能含有一些雜質，在凍干之前的離心過膜步驟去除不了，但凍干之后再溶解就沉淀下來了�；蛘叽置冈趦龈芍斑�加了一些吸附劑來吸附，那么凍干之后再溶解產(chǎn)生的沉淀更多。 最直接的方法是測定溶解之后的酶活力比商品包裝上寫的損失了多少，但我覺得沒必要，損失就損失了，測了之后也不會重新變多。而且如果是用來破壁制備原生質體的蝸牛酶沒必要很純，粗一點沒關系。 有沉淀就先離心再過膜，直接過0.45微米的膜肯定堵的。 我認為有沉淀是正常的，也是可以接受的，最多也就下次買純酶，只要有錢。 |
3樓2012-05-04 10:55:32
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