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thestormcong銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
pcr退火時(shí)間
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| 大家好，請(qǐng)教一個(gè)pcr的問題。我的引物長(zhǎng)度約為70多個(gè)bp，那么在設(shè)計(jì)程序的時(shí)候，引物的退火時(shí)間大概要多長(zhǎng)呢，謝謝！ |
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9樓2012-05-08 21:41:19
jmmchen
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 引物越長(zhǎng)，退火時(shí)間應(yīng)稍微長(zhǎng)一些，1min左右應(yīng)該可以。 |
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thestormcong
2樓2012-05-08 21:09:32
張宏宇123
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【答案】應(yīng)助回帖
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西瓜: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-05-09 18:56:21
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Tm=4（G+C）+2(A+T),Tm值比退火溫度高5-15度。 退火溫度一般為55度-60度，GC<50％,一般用55度；GC>50％，一般用60度。若有非特異性帶，可提高退火溫度，但最好不要高于68度，合適的退火溫度在45-68度。 |
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3樓2012-05-08 21:12:58
張宏宇123
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4樓2012-05-08 21:14:30
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