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[求助]
求助各位大俠！！GUS染色總是染不出好的效果怎么辦
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最近在做大豆GUS瞬時(shí)表達(dá)率方面的試驗(yàn)，可是GUS染色效果總是不理想，染上顏色的外植體數(shù)量非常非常少，而且也只是零零星星的藍(lán)點(diǎn)，要不然就是染色的位置不對(duì)~~這是怎么一回事啊，菌株是不會(huì)有問題的啊 這是我GUS染色液的配方： A 0.2M P.Buffer PH 7.0 KH2PO4 (MW 136.09) 27.22g/L KHPO4 (MW 174.20) 34.84g/L 混合 PH 7.0 B 水 C 10% Tri tonx-100 10ml Tri nx-100用ddH2O 定容至100ml D 38.8 Mm X-glu-tock solution 49.4 ml二甲基甲酰胺 (DMF)溶解1g (100mg) X-glu分裝 -20℃保存 E 50mm K3Fe(CN)6 (MT 329.26) 16.464g/L ddH2O F 50mm K4 Fe(CN)6 (MT 368.358, 18.179g/L) G 100mM EDTA鈉鹽 比例是1ml的染色液里，P.Buffer500ul，Tri tonx-100 K3Fe(CN)6 K4 Fe(CN)6 各加10ul，EDTA鈉鹽 100ul，X-glu 25.78ul，剩下的用ddH2O補(bǔ)齊，將外植體用染色液浸泡并37℃水浴，后用70%酒精脫色~~ 就是這樣，可是效果總是不理想，有沒有哪位幫我分析下原因啊 謝謝！！ |
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3樓2012-09-09 21:05:02
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