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ITS1和ITS4做樣品體系中真菌菌株鑒定，為啥PCR產(chǎn)物竟然是2個條帶？
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RT，對土壤樣品中的真菌菌株鑒定，除了已知某菌株P(guān)CR為單一明亮條帶外，其他土壤樣品的DNA提取物用ITS1和ITS4這對引物擴增在500-700bp大都有2個目標(biāo)條帶。。。。什么情況？ 這樣的PCR產(chǎn)物能夠拿去克隆測序嗎？ 將500-700bp的兩個條帶都切膠回收，可以克隆測序嗎？請高手指點。 |
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在雨中: 回帖置頂 2012-05-22 09:50:30
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1.不同真菌的ITS片段大小是不一樣的，大小在500-750bp之間，個別在1000左右 2.土壤樣品的DNA提取物用ITS1和ITS4這對引物擴增在500-750bp大都有2個目標(biāo)條帶是正常的，因為土壤中的真菌種類很多，所以條帶會多，而且普通電泳無法區(qū)分，所以用切膠回收做克隆測序的話，也會得到很多真菌，而不是單一的，我覺得做克隆測序是可以的 |
2樓2012-05-21 19:09:13
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