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mark870625鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
熒光定量PCR 低濃度質(zhì)粒擴(kuò)增不出來 樓主要瘋了
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熒光定量PCR,用的TAKARA的SYBGREEN體系,相對定量,濃度梯度為6次方到0次方.在實(shí)驗(yàn)結(jié)果中,6-3次方的質(zhì)粒的溶解曲線中間隔很均勻,但是到了后面就什么也沒有了,就和NTC一樣....我的SLOPE=-5.07 還有請問,是不是把質(zhì)粒作到最低濃度,得出的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率可能會(huì)向-3.2靠近呢?比如說從10到0次方的濃度梯度,只做10到5次方質(zhì)粒的斜率和做5到0次方的斜率會(huì)差很遠(yuǎn)嗎? 我覺得這兩條線的斜率應(yīng)該是一樣的才對,但是為什么實(shí)驗(yàn)室?guī)熃阕龀鰜淼臅?huì)差異很大呢?而且她建議我每次定量都盡量做到最低的質(zhì)粒濃度. [ Last edited by 西瓜 on 2012-5-26 at 10:19 ] |
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mark870625
鐵蟲 (初入文壇)
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3樓2012-05-27 13:44:44
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