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skjtg

金蟲 (初入文壇)

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注冊: 2012-03-05
性別: GG
專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)

[求助] 求助氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基使用經(jīng)驗(yàn)

氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基
成分　　蛋白胨　5g 　　酵母浸膏　3g 　　葡萄糖　1g 　　蒸餾水　1000mL 　　1.6%滇甲酚紫－乙醇溶液　1mL 　　L－氨基酸或DL－氨基酸　0.5或1g/100mL 　　pH6.8 　　
制法　　除氨基酸以外的成分加熱溶解后，分裝每瓶100mL，分別加入各種氨基酸：賴氨酸、精氨酸和鳥氨酸。L－氨基酸按0.5%加入，DL－氨基酸按1%加入。再行校正pH至6.8。對照培養(yǎng)基不加氨基酸。分裝于滅菌的小試管內(nèi)，每管0.5mL，上面滴加一層液體石蠟，115℃高壓滅菌10min。　　試驗(yàn)方法　從瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物接種，于36±1℃培養(yǎng)18～24h，觀察結(jié)果。氨基酸脫羧酶陽性者由于產(chǎn)堿，培養(yǎng)基應(yīng)呈紫色。陰性者無堿性產(chǎn)物，但因葡萄糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基變?yōu)辄S色。對照管應(yīng)為黃色。

我用上述的方法制作培養(yǎng)基，但用的是加1.5%瓊脂的平板，從文庫中篩選產(chǎn)脫羧酶的基因。點(diǎn)板后18h后發(fā)現(xiàn)：1、培養(yǎng)基沒有因?yàn)槠咸烟前l(fā)酵產(chǎn)酸變黃，還是呈淡紫色 2、每個(gè)點(diǎn)都長出了大腸桿菌(文庫載體為大腸桿菌)
在此向各位蟲友請教下這個(gè)培養(yǎng)基的使用經(jīng)驗(yàn)，請多多幫忙！

回復(fù)此樓

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1樓 2012-06-02 17:08:51

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