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yilishanshan木蟲 (正式寫手)
大星星
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[求助]
摸索色譜條件，從何下手更快呀？
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最近在摸一個(gè)復(fù)方制劑含測(cè)條件，想多測(cè)幾個(gè)組分，但其中只有一個(gè)組分峰比較高，其他組分好像都降解沒(méi)多少了，目前鎖定5個(gè)組分，但不知道如何入手，我該怎么辦呀！ 首先，我用最簡(jiǎn)單的超聲處理樣品，然后就HPLC進(jìn)樣，先用甲醇-0.1%磷酸進(jìn)了一針，效果不好，就改用乙腈-0.1%磷酸，效果相對(duì)還行，需要再調(diào)整！ 現(xiàn)在的問(wèn)題是，我應(yīng)該盯著乙腈-0.1%磷酸梯度洗脫程序進(jìn)行修改，直到好為止，不行再考慮其他的。還是拿其他的流動(dòng)相試試，改變下酸的種類、濃度，或考慮用甲醇-乙腈的混合溶液？ 是把色譜條件優(yōu)化好了，再考慮樣品的處理方法嗎？可是樣品成分復(fù)雜，色譜峰有些亂，想純化一下！ 關(guān)鍵是，乙腈-0.1%磷酸梯度洗脫程序怎么通過(guò)色譜圖來(lái)判定做出調(diào)整，我一改變比例，有些峰倒是分開(kāi)了，但之前分開(kāi)的峰又不行啦，是否有方法或規(guī)律呢？  |
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t892893235
木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2012-06-15 23:22:10
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2012-06-15 23:22:10
| 色譜摸索的過(guò)程遠(yuǎn)不如我們想象中的簡(jiǎn)單。首先我們得確定樣品是適合正向色譜還是反向色譜（根據(jù)被分析物的極性來(lái)看，極性強(qiáng)的物質(zhì)適合用正向來(lái)分析；反之用反向色譜法）；其次需要選柱子（對(duì)于方向色譜來(lái)說(shuō)，先查下分子量小于2000的話用C18柱，反之用C8柱。還有對(duì)被分析物的極性來(lái)講，C8柱適合分析弱極性物質(zhì)里極性稍強(qiáng)的一類物質(zhì)，C18反之。）再者就是流動(dòng)相的優(yōu)化了，一般（反向）用水和乙腈的效果比較好，不過(guò)通常還需要再優(yōu)化梯度什么的。樓主可以自己試著摸索一下。 |
3樓2012-06-15 09:00:26
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2樓2012-06-15 08:54:19
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5樓2012-06-15 20:14:00
yilishanshan
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6樓2012-06-18 23:51:16
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