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taoziljt金蟲 (初入文壇)
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[求助]
elisa檢測(cè)中結(jié)果不穩(wěn)定 已有1人參與
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| 使用間接elisa做出來的結(jié)果前后兩天差別很大，具體的說是前兩天做的是OD值1.5，ic50 0.3，轉(zhuǎn)天在做就OD值0.2了，顏色上不去，換了所有的緩沖液 顯色液還是顏色上不去，包被原也換了，不同包被原對(duì)比也做了，結(jié)果是不同的包被原顏色都淺，不同批次的抗體也同時(shí)做了對(duì)比，結(jié)果還是一樣，現(xiàn)在找不出問題出現(xiàn)在哪，哪位大俠知道這是怎么回事��？ |
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3樓2012-06-20 08:46:03
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【答案】應(yīng)助回帖
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1.可能溫浴影響，96孔酶標(biāo)板結(jié)構(gòu)特別；易產(chǎn)生邊緣效應(yīng)，抗原抗體結(jié)合及酶促反應(yīng)對(duì)溫度有嚴(yán)格要求，酶標(biāo)板周圍與內(nèi)部孔升降溫速率不同，造成周邊與內(nèi)部孔結(jié)果差異；干浴與水浴存在明顯的差異，盡可能使用水浴，并要求固相板放入水中，減少受熱不均，貼密封膜，防止污物浸入。 2.冼滌是ELISA操作的重要環(huán)節(jié)，手冼條件一致性較差，對(duì)結(jié)果影響較大，半自動(dòng)與全自動(dòng)冼板機(jī)使用不當(dāng)也會(huì)影響結(jié)果，血清中殘留的的纖維蛋白絲或洗滌液析出的結(jié)晶易使洗板。 |
8樓2013-10-03 19:56:22
9樓2016-03-30 20:03:17
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10樓2017-07-02 09:09:49
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