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taoziljt金蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
elisa檢測(cè)中結(jié)果不穩(wěn)定 已有1人參與
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| 使用間接elisa做出來(lái)的結(jié)果前后兩天差別很大，具體的說(shuō)是前兩天做的是OD值1.5，ic50 0.3，轉(zhuǎn)天在做就OD值0.2了，顏色上不去，換了所有的緩沖液 顯色液還是顏色上不去，包被原也換了，不同包被原對(duì)比也做了，結(jié)果是不同的包被原顏色都淺，不同批次的抗體也同時(shí)做了對(duì)比，結(jié)果還是一樣，現(xiàn)在找不出問(wèn)題出現(xiàn)在哪，哪位大俠知道這是怎么回事��？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
尋夢(mèng)五世: 金幣+3, 歡迎新蟲(chóng)來(lái)醫(yī)學(xué)版交流 2012-06-20 00:24:28
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| 我也是個(gè)做ELISA的菜鳥(niǎo)，我想就你的問(wèn)題提點(diǎn)看法，不知道合適否。首先我想你先確定你頭一天OD1.5是做的復(fù)孔嗎？如果是單孔做的話會(huì)不會(huì)是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中板子“跳孔”所致？然后我想問(wèn)問(wèn)你有沒(méi)有排除是二抗的原因，（但據(jù)我的認(rèn)識(shí)一般一天不會(huì)降成這樣的，）如果二抗?jié)舛忍偷脑捒赡軙?huì)降低的。 |
2樓2012-06-19 20:26:22
taoziljt
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3樓2012-06-20 08:46:03
zhangsh168
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4樓2012-10-26 15:03:06
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5樓2012-12-24 10:33:58
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6樓2012-12-27 15:30:28
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7樓2013-09-30 10:16:17
Linwenshi
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【答案】應(yīng)助回帖
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1.可能溫浴影響，96孔酶標(biāo)板結(jié)構(gòu)特別；易產(chǎn)生邊緣效應(yīng)，抗原抗體結(jié)合及酶促反應(yīng)對(duì)溫度有嚴(yán)格要求，酶標(biāo)板周?chē)c內(nèi)部孔升降溫速率不同，造成周邊與內(nèi)部孔結(jié)果差異；干浴與水浴存在明顯的差異，盡可能使用水浴，并要求固相板放入水中，減少受熱不均，貼密封膜，防止污物浸入。 2.冼滌是ELISA操作的重要環(huán)節(jié)，手冼條件一致性較差，對(duì)結(jié)果影響較大，半自動(dòng)與全自動(dòng)冼板機(jī)使用不當(dāng)也會(huì)影響結(jié)果，血清中殘留的的纖維蛋白絲或洗滌液析出的結(jié)晶易使洗板。 |
8樓2013-10-03 19:56:22
你聞聞
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9樓2016-03-30 20:03:17
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10樓2017-07-02 09:09:49
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