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rainbow8新蟲 (小有名氣)
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酵母質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的問題！急！！！大家請關(guān)注
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| 大家好，最近總是覺得質(zhì)粒轉(zhuǎn)化酵母的轉(zhuǎn)化效率比較低，問一下大家：加入多少感受態(tài)和質(zhì)粒？ 有文獻報道40ng感受態(tài)加小于100ng的質(zhì)粒，也有文獻報道65ng加小于1ug的質(zhì)粒，還有文獻報道加不超過2-3ug的質(zhì)粒。我試過前兩個，感覺都差不多，大家有沒有做這方面轉(zhuǎn)化效率高的參數(shù)，指導指導我，謝謝了！��！ |
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rainbow8
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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小丹木木: 金幣+3, MolEPI+1, 正解，這些都很重要 2012-06-27 07:59:18
| 雖然我的質(zhì)粒大概在1ug左右，但是我覺得這些數(shù)據(jù)全都不重要。電轉(zhuǎn)的成功與否完全取決于你對于操作的細節(jié)上的把握。比如電轉(zhuǎn)杯的前處理，比如冰浴，比如電轉(zhuǎn)電壓，比如電轉(zhuǎn)之后菌液的處理。這是我博士期間最大、最真實的感受。我到最后根本不看多少菌多少質(zhì)粒，但是做三次肯定可以出來兩次，只是單克隆多少的問題。電轉(zhuǎn)絕對是細節(jié)決定成敗。 |
4樓2012-06-26 22:33:16
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5樓2012-06-27 09:21:10
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