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Earl_zw銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于以基因組為模版做PCR的問(wèn)題
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| 基因組是從鏈霉菌提取的，但是以它為模板做PCR，沒(méi)有出現(xiàn)我要的條帶，我的目的基因2kb,但p出來(lái)的條帶只有700bp左右還有其他大小不太明顯的條帶 |
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shenye.judy
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
Earl_zw: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-07-02 12:49:12
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
Earl_zw: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-07-02 12:49:12
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有可能你要的模版本身含量就少，所以P不出來(lái)的話(huà)，可以做巢式PCR。 你現(xiàn)在P出來(lái)估計(jì)不是你要的東西，那可能引物的特異性不行。 如果不知道模版的全長(zhǎng)，以及不夠做巢式用的話(huà)，就得花點(diǎn)時(shí)間去搞序列的全長(zhǎng)。 2kb算是長(zhǎng)的序列，普通的PCR酶可能不好用，建議用擴(kuò)增長(zhǎng)序列的酶。 主要也不知道你PCR的目的是什么，所以就籠統(tǒng)回答了些。 |
2樓2012-07-01 14:19:08
aaa20130201
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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3樓2017-04-19 16:28:30
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