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HPLC-ELSD分析成分時，如何判斷峰純度？
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最近在用蒸發(fā)光，雖然是通用型檢測器，對于無紫外吸收的化合物來說，比較適用。但最近出現(xiàn)了一些問題： 1.在蒸發(fā)光為檢測器的液相中，如何判斷一個峰是否為單一成分所產(chǎn)生？（即在分離的過程中，會有些峰會跟另外的峰重合，如何辨別？） 2.在液相條件的篩選中，條件稍微變化一下，峰面積就增加50%，這個合理嗎？ 請教各位了！ |
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herb_fcwr
至尊木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
hbzlj0518: 金幣+1, ★有幫助, 雖然沒有得到問題最終的解答，但是還是很有啟發(fā) 2012-07-07 11:25:33
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hbzlj0518: 金幣+1, ★有幫助, 雖然沒有得到問題最終的解答，但是還是很有啟發(fā) 2012-07-07 11:25:33
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對于如何判斷是否為單一物質(zhì)，如果嫌麻煩可以試著延長出峰時間，還是一個峰的話，只能說90%是沒有重疊的。如果想確定的話，僅靠HPLC檢測是不準確的，可以試試TLC、MS、NMR等檢測方法，還可以試試熔點測定，以上條件都證明是一個化合物，就說明在現(xiàn)有條件和共識下沒有重疊的峰。 至于峰面積增加50%，如果進樣量一致，要看其他峰是否也增加同樣的峰面積，或用外標計算含量是否有變化。其實ELSD與UV沒什么區(qū)別，就是計算式要算個對數(shù)，當然如果峰面積很接近，不用取對數(shù)也沒什么太大的問題。 |
2樓2012-07-06 13:27:54
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謝啦，不過，我用蒸發(fā)光來測定含量，其一，通過TLC，MS,NMR來判定峰純度，這樣不是增加了這個實驗的工作量，況且，即使用TCL在特定指示劑的顯色作用下顯色，也不能在蒸發(fā)光總試用啊，畢竟薄層不能以蒸發(fā)光為監(jiān)測器吧？其實我想判定峰純度，是因為在我需要的測定的成分旁邊有很多小峰，我改變了條件，分離出了幾個，但是，我不能保證我把所有的小峰都與我需要的物質(zhì)分開了。 其二，我疑惑峰面積的原因是因為，我改變了流動相條件，但是峰面積呈現(xiàn)不規(guī)則的變化，比如說，峰A增加50%，而峰B確幾乎沒有增加。我下的結(jié)論是，可能我用的是梯度洗脫，所以，所有的峰面積不呈現(xiàn)相同的變化趨勢。對于這個，我只能用外標法定量，然后再確定是否正常了。 |
3樓2012-07-07 11:24:47
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