 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1716 | 回復(fù): 7 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
77638333金蟲 (著名寫手)
|
[求助]
請(qǐng)問(wèn)Real time q PCR一定要做融解曲線嗎？
|
||
| 有沒(méi)有具體的protocol？謝謝 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有234人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- real time PCR 溶解曲線 目的產(chǎn)物后又出一個(gè)峰 怎么回事
已經(jīng)有5人回復(fù)
- Real-time PCR
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 一個(gè)關(guān)于qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線的問(wèn)題。謝謝！
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 熒光定量擴(kuò)增曲線與融解曲線分析
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 幫我看看這個(gè)溶解qPCR曲線
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 請(qǐng)教real time pcr問(wèn)題，謝謝！
已經(jīng)有10人回復(fù)
- real time PCR能測(cè)定基因組內(nèi)某一基因的拷貝數(shù)嗎？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 關(guān)于real-time PCR溫度優(yōu)化的問(wèn)題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】real time PCR如何去掉雜峰
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】做realtime-PCR，退火溫度很重要嗎？
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】今天做的Rea Time PCR怎么看不到融解曲線？是不是前面設(shè)置出現(xiàn)了問(wèn)題？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】Real time PCR 熔點(diǎn)曲線求助，謝謝
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【專題】評(píng)價(jià)一下您用的Real-Time PCR儀器
已經(jīng)有26人回復(fù)
- 【專題】real time pcr目的基因的融解曲線不明白
已經(jīng)有8人回復(fù)
chenguestc
木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 7
- 應(yīng)助: 576 (博士)
- 貴賓: 0.4
- 金幣: 4526.9
- 散金: 1639
- 紅花: 176
- 帖子: 4708
- 在線: 353.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1337860
- 注冊(cè): 2011-07-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 作物分子育種
3樓2012-08-02 07:47:42
chenguestc
木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 7
- 應(yīng)助: 576 (博士)
- 貴賓: 0.4
- 金幣: 4526.9
- 散金: 1639
- 紅花: 176
- 帖子: 4708
- 在線: 353.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1337860
- 注冊(cè): 2011-07-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 作物分子育種
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
77638333: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝。qPCR參數(shù)已經(jīng)有了。融解曲線的protocols能否詳細(xì)一些？ 2012-08-01 22:25:14
小丹木木: 金幣+3, MolEPI+1, 鼓勵(lì)積極熱心的幫忙解答問(wèn)題 2012-08-02 15:29:35
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
77638333: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝。qPCR參數(shù)已經(jīng)有了。融解曲線的protocols能否詳細(xì)一些？ 2012-08-01 22:25:14
小丹木木: 金幣+3, MolEPI+1, 鼓勵(lì)積極熱心的幫忙解答問(wèn)題 2012-08-02 15:29:35
|
是的。溶解曲線是必須做的。 我們常用到的qPCR supplies 及用量（1個(gè)反應(yīng)，20ul體系）如下，樓主可根據(jù)這個(gè)用量適量調(diào)整： TBSYBRmix 10 ul PrimerF (10uM) 0.6 ul PrimerFR (10uM) 0.6 ul cDNA (20ng/ul) 2 ul Reference dye 0.4 ul ddH2O 6.4 ul PCR條件： 95度 1min 40x 95度 15s 60度 45s 最后，melt curve 95度 15s 60度 45s 95度 15s 可適當(dāng)調(diào)整。 |
2樓2012-08-01 22:10:17
lixc2009
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 602.6
- 散金: 9
- 帖子: 76
- 在線: 23小時(shí)
- 蟲號(hào): 1188951
- 注冊(cè): 2011-01-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-08-02 15:29:49
77638333: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝啦 2012-08-02 17:04:15
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-08-02 15:29:49
77638333: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝啦 2012-08-02 17:04:15
|
溶解曲線只是PCR儀的其中之一的功能，我在做PCR時(shí)有的會(huì)用到，有的不需要做，看你做什么實(shí)驗(yàn)。分享下我的PROTOCOLS: 預(yù)變性： 95℃ 5min *1 PCR ： 95℃ 10s 60℃ 15s *50 72℃ 25s HRM ： 95℃ 1min 40℃ 1min *1 65℃ 1s 95℃ 檢測(cè)熒光 COOLING: 40℃ 10S 希望對(duì)你有幫助！！ |
4樓2012-08-02 09:37:38
77638333
金蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 1804.7
- 散金: 450
- 紅花: 8
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 1312
- 在線: 205.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 568699
- 注冊(cè): 2008-06-04
- 專業(yè): 核技術(shù)及其應(yīng)用
5樓2012-08-02 17:03:25
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
