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so_what無(wú)蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于體外轉(zhuǎn)錄合成探針電泳檢測(cè)問(wèn)題 已有1人參與
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| 小弟最近在做斑馬魚整體胚胎原位雜交,但是在做DIG探針那步遇到問(wèn)題了,用的是pGM-T質(zhì)粒模板體外轉(zhuǎn)錄的,質(zhì)粒經(jīng)過(guò)單酶切后是經(jīng)過(guò)回收純化的,我的探針片段在201nt(是根據(jù)插入片段加上多余的載體序列計(jì)算的),但是用非變性膠鑒定探針的時(shí)候,發(fā)現(xiàn)探針長(zhǎng)度在400-500bp對(duì)應(yīng)于DNA Marker來(lái)說(shuō)的,有點(diǎn)不解,按道理來(lái)說(shuō)RNA應(yīng)該比DNA雙鏈跑得快呢,這是為什么呢,特想各位高手求救,問(wèn)題到底是出現(xiàn)在哪里呢?用的是Roche的體外轉(zhuǎn)錄試劑盒DIG RNA Labelling Kit(SP6/T7),謝謝 各位 |
無(wú)蟲 (初入文壇)
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