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關于體外轉錄合成探針電泳檢測問題 已有1人參與
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| 小弟最近在做斑馬魚整體胚胎原位雜交,但是在做DIG探針那步遇到問題了,用的是pGM-T質粒模板體外轉錄的,質粒經過單酶切后是經過回收純化的,我的探針片段在201nt(是根據插入片段加上多余的載體序列計算的),但是用非變性膠鑒定探針的時候,發(fā)現探針長度在400-500bp對應于DNA Marker來說的,有點不解,按道理來說RNA應該比DNA雙鏈跑得快呢,這是為什么呢,特想各位高手求救,問題到底是出現在哪里呢?用的是Roche的體外轉錄試劑盒DIG RNA Labelling Kit(SP6/T7),謝謝 各位 |
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