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克隆未知基因。有這方面經(jīng)驗(yàn)的戰(zhàn)友幫助下。
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| 我要克隆一個(gè)魚的未知基因。我有以下疑問(wèn)：1，我克隆魚的一個(gè)未知基因。我該找多少生物的該基因來(lái)比對(duì)找保守區(qū)。因?yàn)轸~類的比較少，就兩種魚NCBI里面有Sequence，還是預(yù)測(cè)的，我不得不找人類，小鼠等哺乳動(dòng)物的該基因來(lái)補(bǔ)上。同源性還是有80%的�？梢园�？一共能湊齊七八種，不知道夠不夠？2，簡(jiǎn)并引物設(shè)計(jì)5對(duì)夠不夠？3，PCR條件是按常規(guī)的還是自己優(yōu)化一下比較好哦？4.從開始到拿到基因全長(zhǎng)抓緊時(shí)間的話要多久？謝謝解答，謝謝哦。 |
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7樓2012-08-08 20:03:59
ghs25372216
禁蟲 (正式寫手)
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2樓2012-08-06 17:24:41
chenguestc
木蟲 (職業(yè)作家)
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單純克隆個(gè)基因，用7，8個(gè)魚的序列比對(duì)用保守區(qū)設(shè)計(jì)引物是可以的。 克隆未知基因，樓主是否知道這個(gè)基因控制什么性狀啊，以及為什么要克隆這個(gè)基因呢？是想克隆出來(lái)驗(yàn)證其功能嘛？其次，還需要該基因是否是多基因家族，否則克隆出來(lái)也無(wú)法確定是否就是你需要的基因哈。 |
3樓2012-08-06 18:31:30
4樓2012-08-06 20:49:09
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