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關(guān)于考馬斯亮藍(lán)測(cè)蛋白，有幾個(gè)疑問(wèn)
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1. 考馬斯亮藍(lán)染液的工作液是否需要現(xiàn)用現(xiàn)配呢？ 2.100mgG250溶于50ml95%乙醇和100ml85%磷酸后，此溶液是否可以長(zhǎng)期保存，用時(shí)稀釋？ 3. 每次測(cè)定時(shí)都需要過(guò)濾嗎？ 4. 標(biāo)準(zhǔn)曲線是做一次長(zhǎng)期用呢，還是每換一瓶染液做一次呢，還是每次測(cè)定都要重新做一次呢？ 5. 測(cè)定時(shí)的對(duì)照如何做？比如說(shuō)我用酸溶液粗提取蛋白，離心取上清溶液，此為需測(cè)定樣品，那么對(duì)照是不是就是等體積的酸溶液？ 6.還有沒(méi)有其他注意事項(xiàng)，使測(cè)定的結(jié)果更準(zhǔn)確？  |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
hsd3521: 回帖置頂 2012-08-31 18:52:49
hsd3521: 回帖置頂 2012-08-31 18:52:49
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標(biāo)準(zhǔn)曲線嚴(yán)格來(lái)說(shuō)每次測(cè)定都要重新做的。 對(duì)照除了和樣品的待測(cè)物質(zhì)含量不一樣其他都要一樣，體積也要一樣。 考馬斯亮藍(lán)測(cè)蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線要好好做，如果lz實(shí)驗(yàn)室不是用的Eppendof、Gilson而是大龍之類的移液槍，建議使用移液管做標(biāo)曲，這樣能達(dá)到0.999 |
6樓2012-08-31 17:50:15
vvsober
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
meetogo: 金幣+6, ★★★很有幫助, 同樣謝謝樓上幾位朋友！ 2012-09-02 08:41:19
hsd3521: 回帖置頂 2012-09-02 09:05:05
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hsd3521: 回帖置頂 2012-09-02 09:05:05
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1. 我們實(shí)驗(yàn)室的考馬斯溶液都最多放一個(gè)月的。我試過(guò)超過(guò)一個(gè)月的考馬斯，影響也不是很大。。 2.我怎么記得我們之前是100mgG250最后定容成1000ml用的啊，稀釋好了以后的溶液放1個(gè)月 3. 沒(méi)過(guò)濾過(guò) 4. 配一次考馬斯測(cè)一次標(biāo)曲，每次配的溶液誤差還蠻大的 5. 是的 6.每次測(cè)完的比色皿一定要用乙醇洗洗干凈，徹底干了以后再測(cè)下一組。。 |
7樓2012-09-01 19:32:25
xdz1978
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2樓2012-08-30 16:47:37
3樓2012-08-30 17:33:02
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4樓2012-08-30 17:45:51
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5樓2012-08-31 09:25:49
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