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[求助]
極性特別小,保留時(shí)間特別接近的怎么用hplc分離
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| RT,C8柱,用很大比例乙腈沖十多分鐘才能出峰,基本上完全分不開的兩個(gè)峰,有什么辦法能分開啊 |
金蟲 (正式寫手)
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要分開兩個(gè)峰 不是靠一味增加柱子的保留能力 樓上蟲友的建議有些情況下是對(duì)的 但顯然不適用樓主這個(gè)case 問題的關(guān)鍵是要了解兩個(gè)峰物質(zhì)的差異和特性在哪里 然后再選擇合適的柱子類型 再就是選擇合適的柱子規(guī)格。聽好了 以下才是真正高手的建議 哈哈 : 1.先選擇一個(gè)梯度 當(dāng)然是高乙腈或者高乙醇的 看看乙腈和甲醇的梯度洗脫下 哪個(gè)分離效果更好 做到心中有底 梯度洗脫在無(wú)法找到高效柱子的時(shí)候 是一個(gè)很好的提高柱效的補(bǔ)救辦法 不要只顧用乙腈 甲醇也可以試試; 2.不需再要換普通C18 因?yàn)檫@樣對(duì)兩個(gè)物質(zhì)的保留能力都再提升 長(zhǎng)的保留時(shí)間反而會(huì)使兩個(gè)峰重疊更厲害 個(gè)人推薦碳8亞2微米的短柱 不要小看這類短柱 柱效是很贊的 亞2微米可保證柱效 而且短柱確?s短保留時(shí)間 當(dāng)然 你的HPLC的系統(tǒng)必須是適合亞2微米的 注意連線的管徑大小和真空機(jī)以及系統(tǒng)背壓 3.以上還是不行 就要考慮換不同固定相的柱子 氰基柱 氨基柱 這些保留能力都比C8稍弱 但很可能適宜你兩物質(zhì)的分離 還有要注意是否是羥基封端 有時(shí)也會(huì)影響保留能力 以上 希望對(duì)你有用 |
鐵桿木蟲 (著名寫手)

金蟲 (職業(yè)作家)
新蟲 (小有名氣)
小弟一枚

金蟲 (正式寫手)
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大家注意 HPLC中溫度只有一個(gè)功能 絕對(duì)不是改善分離 哈哈 壇子里很多蟲友應(yīng)該多看看書啊 告訴你 溫度唯一的功能 就只是改善降低系統(tǒng)背壓 而且降低的幅度很有限 所以 改變溫度在這里根本沒有用 不要問我為什么可以降壓這么幼稚的問題 別說你不懂 關(guān)于樓主的梯度 個(gè)人意見是可以配置一瓶80%的乙腈和100%乙腈 走梯度 慢慢切換至純乙腈 同樣的用甲醇也可以一試 看看梯度對(duì)出峰是否有改善 你的case可能換柱子效果會(huì)更好些 除了固定相 規(guī)格也很重要 一定要注意 |
木蟲 (正式寫手)
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