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[求助]
極性特別小，保留時間特別接近的怎么用hplc分離
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| RT，C8柱，用很大比例乙腈沖十多分鐘才能出峰，基本上完全分不開的兩個峰，有什么辦法能分開啊 |
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lihuan0525
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3樓2012-09-03 08:57:39
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lzdx: 金幣+3 2012-09-03 15:13:50
xbqewpq: 金幣+3, 感謝應(yīng)助，歡迎常來分析版交流 ^ ^ 2012-09-04 14:34:42
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要分開兩個峰 不是靠一味增加柱子的保留能力 樓上蟲友的建議有些情況下是對的 但顯然不適用樓主這個case 問題的關(guān)鍵是要了解兩個峰物質(zhì)的差異和特性在哪里 然后再選擇合適的柱子類型 再就是選擇合適的柱子規(guī)格。聽好了 以下才是真正高手的建議 哈哈 ： 1.先選擇一個梯度 當(dāng)然是高乙腈或者高乙醇的 看看乙腈和甲醇的梯度洗脫下 哪個分離效果更好 做到心中有底 梯度洗脫在無法找到高效柱子的時候 是一個很好的提高柱效的補救辦法 不要只顧用乙腈 甲醇也可以試試； 2.不需再要換普通C18 因為這樣對兩個物質(zhì)的保留能力都再提升 長的保留時間反而會使兩個峰重疊更厲害 個人推薦碳8亞2微米的短柱 不要小看這類短柱 柱效是很贊的 亞2微米可保證柱效 而且短柱確保縮短保留時間 當(dāng)然 你的HPLC的系統(tǒng)必須是適合亞2微米的 注意連線的管徑大小和真空機以及系統(tǒng)背壓 3.以上還是不行 就要考慮換不同固定相的柱子 氰基柱 氨基柱 這些保留能力都比C8稍弱 但很可能適宜你兩物質(zhì)的分離 還有要注意是否是羥基封端 有時也會影響保留能力 以上 希望對你有用 |
5樓2012-09-03 14:11:52
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