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[求助]
極性特別小，保留時(shí)間特別接近的怎么用hplc分離
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| RT，C8柱，用很大比例乙腈沖十多分鐘才能出峰，基本上完全分不開(kāi)的兩個(gè)峰，有什么辦法能分開(kāi)啊 |
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bcschina
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lzdx: 金幣+3 2012-09-03 15:13:50
xbqewpq: 金幣+3, 感謝應(yīng)助，歡迎常來(lái)分析版交流 ^ ^ 2012-09-04 14:34:42
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要分開(kāi)兩個(gè)峰 不是靠一味增加柱子的保留能力 樓上蟲(chóng)友的建議有些情況下是對(duì)的 但顯然不適用樓主這個(gè)case 問(wèn)題的關(guān)鍵是要了解兩個(gè)峰物質(zhì)的差異和特性在哪里 然后再選擇合適的柱子類型 再就是選擇合適的柱子規(guī)格。聽(tīng)好了 以下才是真正高手的建議 哈哈 ： 1.先選擇一個(gè)梯度 當(dāng)然是高乙腈或者高乙醇的 看看乙腈和甲醇的梯度洗脫下 哪個(gè)分離效果更好 做到心中有底 梯度洗脫在無(wú)法找到高效柱子的時(shí)候 是一個(gè)很好的提高柱效的補(bǔ)救辦法 不要只顧用乙腈 甲醇也可以試試； 2.不需再要換普通C18 因?yàn)檫@樣對(duì)兩個(gè)物質(zhì)的保留能力都再提升 長(zhǎng)的保留時(shí)間反而會(huì)使兩個(gè)峰重疊更厲害 個(gè)人推薦碳8亞2微米的短柱 不要小看這類短柱 柱效是很贊的 亞2微米可保證柱效 而且短柱確�？s短保留時(shí)間 當(dāng)然 你的HPLC的系統(tǒng)必須是適合亞2微米的 注意連線的管徑大小和真空機(jī)以及系統(tǒng)背壓 3.以上還是不行 就要考慮換不同固定相的柱子 氰基柱 氨基柱 這些保留能力都比C8稍弱 但很可能適宜你兩物質(zhì)的分離 還有要注意是否是羥基封端 有時(shí)也會(huì)影響保留能力 以上 希望對(duì)你有用 |
5樓2012-09-03 14:11:52
guevara1967
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2樓2012-09-01 09:18:14
lihuan0525
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3樓2012-09-03 08:57:39
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13樓2012-09-04 17:21:17
4樓2012-09-03 10:13:41
殘暴的肉球
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6樓2012-09-03 14:20:46
7樓2012-09-03 15:12:12
8樓2012-09-03 15:13:38
bcschina
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【答案】應(yīng)助回帖
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大家注意 HPLC中溫度只有一個(gè)功能 絕對(duì)不是改善分離 哈哈 壇子里很多蟲(chóng)友應(yīng)該多看看書(shū)啊 告訴你 溫度唯一的功能 就只是改善降低系統(tǒng)背壓 而且降低的幅度很有限 所以 改變溫度在這里根本沒(méi)有用 不要問(wèn)我為什么可以降壓這么幼稚的問(wèn)題 別說(shuō)你不懂 關(guān)于樓主的梯度 個(gè)人意見(jiàn)是可以配置一瓶80%的乙腈和100%乙腈 走梯度 慢慢切換至純乙腈 同樣的用甲醇也可以一試 看看梯度對(duì)出峰是否有改善 你的case可能換柱子效果會(huì)更好些 除了固定相 規(guī)格也很重要 一定要注意 |
9樓2012-09-04 12:30:20
xp_best
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10樓2012-09-04 14:05:00
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