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liu58yeying金蟲 (小有名氣)
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[求助]
提高血漿前處理回收率
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請問一下大家,我在做一個化合物的空白血漿回收率測定實驗,F在回收率竟然低到10%左右,但不知道問題出來哪里。化合物有兩個酚羥基,應該略顯酸性,并且有一個較長的脂肪鏈,估計極性偏小。我的處理方法如下:1. 加入蛋白沉淀劑。 2. 混勻超聲。3. 13000 r/min 離心。4 取上清。5. 旋干并復溶 進樣HPLC。 我感覺這個化合物的血漿蛋白結合率會很高吧,是在離心的這一步,化合物都被裹在下面的不溶物里面了。應該怎樣提高回收率呢, 是不是要調整一下PH呢(比如加入低濃度的鹽酸),或者增加超聲時間? 剛剛做代謝,請多指教啊,謝謝。 |
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還是建議試一下液液萃取,將血漿酸化,加10%的甲酸10~20ul。因為你的化合物是酸性的,調整水相PH低于化合物2~3個PH,理論上是可以提高回收率的。 |
金蟲 (小有名氣)
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