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liu58yeying金蟲 (小有名氣)
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[求助]
提高血漿前處理回收率
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請問一下大家，我在做一個化合物的空白血漿回收率測定實驗�，F(xiàn)在回收率竟然低到10%左右，但不知道問題出來哪里�；衔镉袃蓚�酚羥基，應(yīng)該略顯酸性，并且有一個較長的脂肪鏈，估計極性偏小。我的處理方法如下：1. 加入蛋白沉淀劑。 2. 混勻超聲。3. 13000 r/min 離心。4 取上清。5. 旋干并復溶 進樣HPLC。 我感覺這個化合物的血漿蛋白結(jié)合率會很高吧，是在離心的這一步，化合物都被裹在下面的不溶物里面了。應(yīng)該怎樣提高回收率呢, 是不是要調(diào)整一下PH呢（比如加入低濃度的鹽酸），或者增加超聲時間？ 剛剛做代謝，請多指教啊，謝謝。 |
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還是建議試一下液液萃取，將血漿酸化，加10%的甲酸10~20ul。因為你的化合物是酸性的，調(diào)整水相PH低于化合物2~3個PH，理論上是可以提高回收率的。 |
liu58yeying4樓2012-09-27 13:01:04
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