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[求助]
植物CAT測(cè)定問題
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| 我昨天測(cè)CAT時(shí)，數(shù)據(jù)變動(dòng)的很慢，我記得以前測(cè)了一次變動(dòng)的很快啊，最后兩位數(shù)不停的在變動(dòng)，然后5s讀一次數(shù)，但以前測(cè)的可能不大對(duì)，我從找了確定的方法開始測(cè)，昨天按新方法測(cè)不知道怎么搞的和以前不一樣，我是取了200mlPBS加0.3092ml過氧化氫當(dāng)反應(yīng)液，酶液是取了0.1毫升，反應(yīng)很明顯，比色皿里面氣泡很多，但是測(cè)的時(shí)候數(shù)據(jù)就是變動(dòng)很慢，我是1min讀一次數(shù)，結(jié)果有時(shí)1min后數(shù)據(jù)沒變動(dòng)，得再等個(gè)十幾秒再動(dòng)，下一分鐘卻準(zhǔn)時(shí)的變了，而且我平行之間數(shù)據(jù)重現(xiàn)性很高，有時(shí)候幾個(gè)平行之間好幾個(gè)數(shù)都一樣但又有個(gè)數(shù)不一樣這不就差大了？我這儀器沒問題。請(qǐng)問大家測(cè)植物CAT時(shí)也是這樣嗎？你們數(shù)據(jù)變化的快嘛？我這個(gè)正常嗎？ |
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不能發(fā)帖了，再提問個(gè)問題。。。，做植物的都懂點(diǎn)應(yīng)該。測(cè)MDA的時(shí)候需要測(cè)3個(gè)波長(zhǎng)下的吸光度值，大家是怎么測(cè)的啊，測(cè)完一個(gè)波長(zhǎng)倒回去再重新調(diào)波長(zhǎng)調(diào)零再拿剛才的樣品再測(cè)一次？這樣樣品來(lái)回使用有影響嗎？我這有個(gè)UV762型紫外可見分光光度計(jì)，有個(gè)模式是多波長(zhǎng)測(cè)量，但是我不會(huì)用，大家有會(huì)用多波長(zhǎng)測(cè)量的嗎？3個(gè)波長(zhǎng)下怎么同時(shí)調(diào)零？ 多波長(zhǎng)測(cè)量模式如下： 測(cè)量模式： T/ABS 波長(zhǎng)數(shù)：3 波長(zhǎng) ABS 入1 入2 入3 上面那個(gè)模式得選ABS吧？下面輸入波長(zhǎng)后，怎么調(diào)零？還是直接放樣品就測(cè)？求高手解答 |
2樓2012-10-18 09:22:16
starseacow
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a71840584: 金幣+9, ★★★很有幫助 2012-10-28 18:59:32
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a71840584: 金幣+9, ★★★很有幫助 2012-10-28 18:59:32
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你第一個(gè)帖子中的問題，我以前做在一些樣品中偶爾見過這種現(xiàn)象，加了酶液開始反應(yīng)但沒有變化，這很可能和酶液保存過程中發(fā)生某些未知變化有關(guān)，總之是有的樣品做不出來(lái)了。我的方案是每個(gè)處理多做幾個(gè)重復(fù)。但如你所說成批次的沒有結(jié)果，在排除儀器和測(cè)定方法的問題后，看看你的酶提取是不是有問題，有些試劑是否需要重新配置。另外，在做CAT或其他酶活前，最好做個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)，測(cè)測(cè)你的測(cè)定條件下，對(duì)照組樣品酶活變動(dòng)情況。一般酶活變化隨時(shí)間呈S型曲線，盡量選擇其中斜線快速變化段測(cè)定。 第二個(gè)問題，我沒印象762是什么樣子的了，如果是有四個(gè)比色皿槽那種，就準(zhǔn)備四個(gè)比色皿，一個(gè)作為空白調(diào)零，樣品準(zhǔn)備三份放在不同比色皿內(nèi)，測(cè)一個(gè)后改變波長(zhǎng)調(diào)零，再測(cè)下一個(gè)。我以前用UV2401PC，可以直接掃全波長(zhǎng)，每個(gè)樣品我就直接掃了，再讀數(shù)計(jì)算。 |
3樓2012-10-18 18:24:29
smile未央
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