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[求助]
植物CAT測定問題
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| 我昨天測CAT時，數(shù)據(jù)變動的很慢，我記得以前測了一次變動的很快啊，最后兩位數(shù)不停的在變動，然后5s讀一次數(shù)，但以前測的可能不大對，我從找了確定的方法開始測，昨天按新方法測不知道怎么搞的和以前不一樣，我是取了200mlPBS加0.3092ml過氧化氫當(dāng)反應(yīng)液，酶液是取了0.1毫升，反應(yīng)很明顯，比色皿里面氣泡很多，但是測的時候數(shù)據(jù)就是變動很慢，我是1min讀一次數(shù)，結(jié)果有時1min后數(shù)據(jù)沒變動，得再等個十幾秒再動，下一分鐘卻準(zhǔn)時的變了，而且我平行之間數(shù)據(jù)重現(xiàn)性很高，有時候幾個平行之間好幾個數(shù)都一樣但又有個數(shù)不一樣這不就差大了？我這儀器沒問題。請問大家測植物CAT時也是這樣嗎？你們數(shù)據(jù)變化的快嘛？我這個正常嗎？ |
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smile未央
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4樓2013-03-25 13:45:28
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不能發(fā)帖了，再提問個問題。。。，做植物的都懂點(diǎn)應(yīng)該。測MDA的時候需要測3個波長下的吸光度值，大家是怎么測的啊，測完一個波長倒回去再重新調(diào)波長調(diào)零再拿剛才的樣品再測一次？這樣樣品來回使用有影響嗎？我這有個UV762型紫外可見分光光度計，有個模式是多波長測量，但是我不會用，大家有會用多波長測量的嗎？3個波長下怎么同時調(diào)零？ 多波長測量模式如下： 測量模式： T/ABS 波長數(shù)：3 波長 ABS 入1 入2 入3 上面那個模式得選ABS吧？下面輸入波長后，怎么調(diào)零？還是直接放樣品就測？求高手解答 |
2樓2012-10-18 09:22:16
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你第一個帖子中的問題，我以前做在一些樣品中偶爾見過這種現(xiàn)象，加了酶液開始反應(yīng)但沒有變化，這很可能和酶液保存過程中發(fā)生某些未知變化有關(guān)，總之是有的樣品做不出來了。我的方案是每個處理多做幾個重復(fù)。但如你所說成批次的沒有結(jié)果，在排除儀器和測定方法的問題后，看看你的酶提取是不是有問題，有些試劑是否需要重新配置。另外，在做CAT或其他酶活前，最好做個預(yù)實(shí)驗，測測你的測定條件下，對照組樣品酶活變動情況。一般酶活變化隨時間呈S型曲線，盡量選擇其中斜線快速變化段測定。 第二個問題，我沒印象762是什么樣子的了，如果是有四個比色皿槽那種，就準(zhǔn)備四個比色皿，一個作為空白調(diào)零，樣品準(zhǔn)備三份放在不同比色皿內(nèi)，測一個后改變波長調(diào)零，再測下一個。我以前用UV2401PC，可以直接掃全波長，每個樣品我就直接掃了，再讀數(shù)計算。 |
3樓2012-10-18 18:24:29
5樓2013-03-25 20:53:32
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