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wei_suzhen新蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR擴增后，除了marker什么都沒有，是什么原因呀？
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這是我引物的一些信息：上游引物的GC％含量是54.5％，Tm值是64.5°C,；下游引物GC％含量是66.7％，Tm值67.4°C。今天PCR通過設(shè)計退火溫度梯度53.3℃、53.9℃、55.3℃、56.4℃、57.6℃、58.0℃，94℃預(yù)變性5min,94℃變性30s,72℃延伸2min,退貨時間45s，30個循環(huán)。目的基因長度1257bp,配的0.8％的膠，190V電壓（實驗室都用這個電壓），電泳后檢測，除了maker什么都沒有.不知道什么哪出問題啦？求大師指點。 [ Last edited by wei_suzhen on 2012-10-19 at 16:01 ] |
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2012-10-19 15:50:48, 40.43 K
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5樓2012-10-19 22:37:24
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