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牛鼻象金蟲 (小有名氣)
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[求助]
無(wú)對(duì)照品，怎么確定含量
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| 各位蟲友：現(xiàn)在拿到一個(gè)較新的抗癌活性成分，水溶性不好，想制備脂質(zhì)體，但是沒(méi)有對(duì)照品，經(jīng)過(guò)了幾次精制，純度較高，請(qǐng)問(wèn)應(yīng)該怎么確定其中主藥含量，應(yīng)該怎么制備工作對(duì)照品？謝謝！ |
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jing6808
銅蟲 (初入文壇)
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3樓2012-10-24 17:00:28
wind1860
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
karl2100: 金幣+1, 謝謝！ 2012-10-24 21:18:13
牛鼻象: 金幣+5, ★★★很有幫助, 謝謝，還是不太明白，怎么用液相色譜確定主成分含量（無(wú)對(duì)照品情況下）？ 2012-10-25 23:03:58
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
karl2100: 金幣+1, 謝謝！ 2012-10-24 21:18:13
牛鼻象: 金幣+5, ★★★很有幫助, 謝謝，還是不太明白，怎么用液相色譜確定主成分含量（無(wú)對(duì)照品情況下）？ 2012-10-25 23:03:58
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對(duì)照品的標(biāo)化 對(duì)照品的質(zhì)量直接影響到檢驗(yàn)樣品的結(jié)果。因此，對(duì)照品的標(biāo) 化十分重要，中國(guó)藥品生物制品檢定所為此制定了嚴(yán)格的標(biāo)化程 序。 首先應(yīng)根據(jù)中國(guó)藥典或衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)，參考USP，BP，JP等國(guó)外 藥典，查閱Merk Index等資料 確定對(duì)照品的標(biāo)化項(xiàng)目和檢驗(yàn)方 法。標(biāo)化內(nèi)容包括： (1)物理常數(shù)的測(cè)定 1)熔點(diǎn)：依藥典方法進(jìn)行，取三次測(cè)定的平均值加溫度計(jì)的校 正值。熔點(diǎn)現(xiàn)象不易觀察的品種加作DSC熔點(diǎn)測(cè)定。 2)比旋度：按藥典規(guī)定的方法測(cè)定，空白左右分別測(cè)定3次，樣 品左右分別測(cè)定5次，計(jì)算平均值。 3)吸收系數(shù)(E： )值：測(cè)定時(shí)要求平行兩份樣品，每份樣品按兩 個(gè)濃度(藥典濃度±10％)進(jìn)行測(cè)定。 (2)純度考察 重點(diǎn)用薄層色譜法和高效液相色譜法兩種方法作“有關(guān)物質(zhì)” 檢查： 1)薄層色譜法：要求兩個(gè)展開系統(tǒng)，顯色靈敏度要達(dá)到檢測(cè)量 的0．1％ ～0．2％。對(duì)照液的點(diǎn)樣量為梯度，樣品液的點(diǎn)樣量為藥典量 和藥典的加倍量。實(shí)驗(yàn)的結(jié)果要報(bào)出樣品的Rf值、雜質(zhì)的量。當(dāng)雜 質(zhì)的量較大時(shí)，要用雙向展開的方法確定樣品是否分解。 2)高效液相色譜法：要求兩種流動(dòng)相或不同型號(hào)的兩根柱子， 最小檢出量要達(dá)到檢測(cè)量的0．1％ ，進(jìn)樣量為藥典量和藥典量的加 倍量，進(jìn)行二極管陣列檢測(cè)峰純度，用歸一化法或主成分自身稀釋 對(duì)照法計(jì)算雜質(zhì)量。 (3)含量測(cè)定 要求用兩種方法測(cè)定含量。一般為容量法和色譜法。容量法要 求兩人分別測(cè)定3～5份。每人的平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及兩人的實(shí)驗(yàn)結(jié) 果的相對(duì)偏差均應(yīng)小于0．3％。高效液相色譜法需用3種濃度作校 正因子，精密度要求尼 小于1．5％。若用分光光度法測(cè)定含量，必 須用對(duì)照品法，E值法只能作參考。含量測(cè)定用的化學(xué)對(duì)照品還要 求作DSC純度測(cè)定。 這是基本點(diǎn)，但是前提你必須結(jié)構(gòu)確證是正確的物質(zhì)，不然做什么都是白搭。 |
2樓2012-10-24 14:45:47
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