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不鳴鳥木蟲 (正式寫手)
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[求助]
求助設(shè)計(jì)引物加兩個(gè)酶切位點(diǎn)
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要擴(kuò)增一段1.6~1.7kb左右的目的基因，篩選出了一對(duì)效果比較好的引物： 上游：5‘-GTGATTATTCATTTCGGAGGGTG-3’ 下游：5‘-CAGGGTTCTTAATACATACATTGCT-3’ 現(xiàn)在不想用T載體的酶切位點(diǎn)，想用simple T 克隆。在目的基因5’端加X(jué)baI 酶切位點(diǎn)，3‘端加SalI酶切位點(diǎn) SalI識(shí)別位點(diǎn) 5’-G’‘TCGAC-3' 3'-CAGCT,G-5' XbaI識(shí)別位點(diǎn) 5‘-T’‘CTAGA-3’ 3‘-AGATC,T-5' 請(qǐng)指導(dǎo)一下具體怎么加，需要加保護(hù)堿基嗎 或者教給我方法，有資料也可以 新手先謝謝啦 |
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draco1987
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4樓2012-11-02 15:51:28
zhlf1989513
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2樓2012-11-02 14:05:57
不鳴鳥
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3樓2012-11-02 14:13:07
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那個(gè)。。。實(shí)在不好意思，剛才我腦抽了，帶XbaI酶切位點(diǎn)的是pMD19-T，不是simple5樓2012-11-02 15:59:59
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