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不鳴鳥木蟲 (正式寫手)
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[求助]
求助設(shè)計引物加兩個酶切位點
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要擴增一段1.6~1.7kb左右的目的基因，篩選出了一對效果比較好的引物： 上游：5‘-GTGATTATTCATTTCGGAGGGTG-3’ 下游：5‘-CAGGGTTCTTAATACATACATTGCT-3’ 現(xiàn)在不想用T載體的酶切位點，想用simple T 克隆。在目的基因5’端加XbaI 酶切位點，3‘端加SalI酶切位點 SalI識別位點 5’-G’‘TCGAC-3' 3'-CAGCT,G-5' XbaI識別位點 5‘-T’‘CTAGA-3’ 3‘-AGATC,T-5' 請指導(dǎo)一下具體怎么加，需要加保護堿基嗎 或者教給我方法，有資料也可以 新手先謝謝啦 |
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不鳴鳥
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那個。。。實在不好意思，剛才我腦抽了，帶XbaI酶切位點的是pMD19-T，不是simple5樓2012-11-02 15:59:59
zhlf1989513
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