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zfgtianya鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
HPLC分離未知物質(zhì)。
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| 哪位高手指點一下，我有一種微生物發(fā)酵的未知的物質(zhì)，想用高效分離出來。以前從沒做過，也沒有人帶我，請問實驗方案應(yīng)該怎么制定呢。越詳越好了。謝了！��！ |
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reilon
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2樓2012-11-11 14:44:16
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2012-11-12 18:37:51
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xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2012-11-12 18:37:51
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先摸清極性，酸堿性，穩(wěn)定性，最大吸收波長等性質(zhì)，初步建立定性定量方法；發(fā)酵液組分復(fù)雜，建議先用TLC摸摸有多少組分，目標(biāo)組分是幾個，并且還能摸索下較好的展開劑系統(tǒng)，便于在此基礎(chǔ)上摸索HPLC流動相系統(tǒng)；最后上HPLC前發(fā)酵液還得處理，確定正相還是反相柱，選好摸流動相所需的溶劑，接著就不斷調(diào)比例直到主峰峰形好，與雜峰分開。做TLC各個點分的較好的話可把目標(biāo)組分刮下溶解，再上HPLC就能知道主峰保留時間，量多的話還能做一個相對標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
3樓2012-11-12 15:31:29
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4樓2012-11-12 17:36:32
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5樓2012-11-12 17:46:54
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8樓2012-11-14 20:57:51
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