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引物二聚體會(huì)不會(huì)影響目的基因的遷移?
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如題 簡(jiǎn)單點(diǎn)說(shuō)：切膠的時(shí)候 會(huì)不會(huì)你切300bp的條帶 實(shí)際上是350bp或250bp長(zhǎng)？ 或者 小片段會(huì)夾雜在大片段里 你切的大片段里最終還是存在有部分小片段？ 兩個(gè)疑問(wèn) 大家暢所欲言吧 |
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yyk81
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
曾秀鳳: 金幣+30, ★★★★★最佳答案, 我們也是EB后染的 所以應(yīng)該片段選擇比較精確 對(duì)吧 結(jié)果切膠回收后檢測(cè)還是會(huì)發(fā)現(xiàn)目的片段里有小片段的存在 所以很困惑 2012-11-26 08:54:12
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
曾秀鳳: 金幣+30, ★★★★★最佳答案, 我們也是EB后染的 所以應(yīng)該片段選擇比較精確 對(duì)吧 結(jié)果切膠回收后檢測(cè)還是會(huì)發(fā)現(xiàn)目的片段里有小片段的存在 所以很困惑 2012-11-26 08:54:12
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你的問(wèn)題應(yīng)該分3個(gè)層面回答。1，引物二聚體不影響目的產(chǎn)物的遷移。2，目的帶的大小想精確反映在膠上，電泳時(shí)不能加核酸染料，跑完膠后在再染色，跑出來(lái)是多大就是多大，不失真，不會(huì)出現(xiàn)250bp看起來(lái)像300bp的情況。3，如果想分開大小很接近兩條帶，需要提高分辨率，提高膠濃度是個(gè)好辦法。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
6樓2012-11-25 08:11:25
【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
曾秀鳳: 金幣+10, ★有幫助, 我們?cè)谟懻撜f(shuō) 目的片段與引物二聚體可以分的很開的情況下 會(huì)不會(huì)有部分引物二聚體它纏在目的片段中間 不能通過(guò)切膠的方法去除引物二聚體的小片段？ 您覺(jué)得有這種可能不 2012-11-26 08:50:00
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
曾秀鳳: 金幣+10, ★有幫助, 我們?cè)谟懻撜f(shuō) 目的片段與引物二聚體可以分的很開的情況下 會(huì)不會(huì)有部分引物二聚體它纏在目的片段中間 不能通過(guò)切膠的方法去除引物二聚體的小片段？ 您覺(jué)得有這種可能不 2012-11-26 08:50:00
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會(huì)。如果maker不好的話，那個(gè)帶的位置就不對(duì)了 引物二聚體在跑膠時(shí)一般會(huì)在最下面，片段不會(huì)太大，100bp左右，如果你的目的片段小的話則有可能混在一起，但是片段大的話引物二聚體不會(huì)影響到 |
2樓2012-11-24 14:52:21
seanzhu1996
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3樓2012-11-24 15:12:44
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4樓2012-11-24 15:16:30
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