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314584069木蟲 (小有名氣)
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[求助]
植物樣品可溶性糖測定 已有1人參與
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這幾天忙著做植物可溶性糖 方法大致如下：試劑： 1. 80%乙醇 2. 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取1.000g葡萄糖溶于蒸餾水并定容至1000ml，從此液中吸取0、1.5、3、4.5、6、7.5、9毫升注入100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，此溶液即0、15、30、45、60、75、90 mg/L糖溶液，分別吸取系列標(biāo)準(zhǔn)糖液各2ml分別注入7個比色管中，沿管壁緩緩注入蒽酮試劑0.5ml，再緩慢地加入5ml濃H2SO4，加完后立即搖動半分鐘，放入沸水浴中加熱10分鐘，取出后放入冷水中迅速冷卻，待10分鐘后，使之顯色穩(wěn)定，于620nm波長光源下比色，測的光密度。 3.蒽酮試劑：1g蒽酮，用乙酸乙酯溶解，定容至50ml，棕色瓶避光處貯藏； 儀器設(shè)備:分光光度計，分析天平，離心管，離心機，恒溫水浴，試管，三角瓶，移液管（5、1、0.5ml），剪刀，瓷盤，玻璃棒。水浴鍋，電爐。漏斗。濾紙 實驗步驟 1.提取 可溶性糖的提�。r樣） 取新鮮甘薯樣品，擦凈表面污物，剪碎混勻，稱取2 g，放入帶刻度試管中，加入10mL 蒸餾水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min（提取2次），提取液過濾入50mL容量瓶中，反復(fù)沖洗試管及殘渣，定容至刻度。 2.樣品測定 吸取5ml的糖提取液至一個100ml容量瓶中，用蒸餾水定容，取2ml此稀釋的糖提取液至一個具有塞的比色管中，然后沿管壁緩緩注入蒽酮試劑0.5 ml，再緩慢地加入5ml濃H2SO4，加完后立即搖動半分鐘，放入沸水浴中加熱10分鐘，取出后放入冷水中迅速冷卻，待10分鐘后，使之顯色穩(wěn)定，于620nm波長光源下進(jìn)行比色，測的光密度。 3. 結(jié)果計算 根據(jù)光密度讀數(shù)，自變準(zhǔn)曲線上查出含糖量（mg/L），然后代入下列公式中計算： 可溶性糖%（克/100克)=mg/L×100×50/5×10-6/樣品重×100 我用的鮮樣 出來結(jié)果也太大啦 都20%啦 一般鮮樣應(yīng)該在10%以內(nèi)的 跪求問題出在哪里啊 ？ |
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洪飛飛
銅蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
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gyfgood: 金幣+5, 很詳細(xì)，很認(rèn)真的回答！ 2012-12-02 18:55:42
gyfgood: 金幣+5, 很詳細(xì)，很認(rèn)真的回答！ 2012-12-02 18:55:42
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1、銅還原－直接滴定法(Lane-Eynon’s method)， 用標(biāo)準(zhǔn)糖液滴定費林試劑，得到費林試劑與糖的相當(dāng)量，再用待測糖液滴定，用亞(次)甲基藍(lán)作指示劑。 適測范圍：含糖50mg/10～50ml糖待測液。 2、銅還原－高錳酸鉀容量法(Munson-Walker method)， 還原糖與費林試劑作用生成Cu2O↓，將Cu2O沉淀洗凈后，用Fe2(SO4)3溶解，生成FeSO4，用標(biāo)準(zhǔn)的高錳酸鉀溶液滴定生成的Fe2+,求得還原糖消耗的費林試劑量，進(jìn)而計算出還原糖的含量。 適測范圍：含糖50～80mg/20ml糖待測液 3、費(斐)林－碘量法， 費林酸鈉滴定，根據(jù)費林試劑的消耗量計算糖試劑與糖反應(yīng)生成糖酸和Cu2O↓，剩余的費林試劑中的Cu2+與I-反應(yīng)，生成I2；用硫代硫的含量。 適測范圍：含糖2～20mg/5～10ml糖待測液。 4、夏費－索姆吉法(Shaller-Somogyi’s method)，又稱為銅還原－碘量法， 利用糖與費林試劑作用生成Cu2O↓，碘化鉀與碘酸鉀作用生成I2，溶液酸化后，Cu2O溶解出的Cu+與碘反應(yīng)消耗一部分I2，剩余的碘用硫代硫酸鈉溶液滴定；為防治Cu2+在酸性條件下氧化I-生成I2干擾測定，在加入碘化鉀的同時加入草酸，將其除去。 適測范圍：含糖0.5～2.5mg/5ml糖待測液。 5、氰化鹽－碘量法， 鐵氰化鉀與還原糖反應(yīng)，被還原為亞鐵氰化鉀，剩余的鐵氰化鉀用碘量法測定(鐵氰化鉀在酸性條件下氧化I－生成I2，用硫代硫酸鈉滴定)。 適測范圍：含糖1～15mg/10ml糖待測液。 |
2樓2012-11-30 21:45:30
314584069
木蟲 (小有名氣)
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6樓2018-04-11 22:10:30
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