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314584069木蟲 (小有名氣)
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[求助]
植物樣品可溶性糖測(cè)定 已有1人參與
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這幾天忙著做植物可溶性糖 方法大致如下:試劑: 1. 80%乙醇 2. 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取1.000g葡萄糖溶于蒸餾水并定容至1000ml,從此液中吸取0、1.5、3、4.5、6、7.5、9毫升注入100ml容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,此溶液即0、15、30、45、60、75、90 mg/L糖溶液,分別吸取系列標(biāo)準(zhǔn)糖液各2ml分別注入7個(gè)比色管中,沿管壁緩緩注入蒽酮試劑0.5ml,再緩慢地加入5ml濃H2SO4,加完后立即搖動(dòng)半分鐘,放入沸水浴中加熱10分鐘,取出后放入冷水中迅速冷卻,待10分鐘后,使之顯色穩(wěn)定,于620nm波長(zhǎng)光源下比色,測(cè)的光密度。 3.蒽酮試劑:1g蒽酮,用乙酸乙酯溶解,定容至50ml,棕色瓶避光處貯藏; 儀器設(shè)備:分光光度計(jì),分析天平,離心管,離心機(jī),恒溫水浴,試管,三角瓶,移液管(5、1、0.5ml),剪刀,瓷盤,玻璃棒。水浴鍋,電爐。漏斗。濾紙 實(shí)驗(yàn)步驟 1.提取 可溶性糖的提取(鮮樣) 取新鮮甘薯樣品,擦凈表面污物,剪碎混勻,稱取2 g,放入帶刻度試管中,加入10mL 蒸餾水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液過(guò)濾入50mL容量瓶中,反復(fù)沖洗試管及殘?jiān),定容至刻度?br /> 2.樣品測(cè)定 吸取5ml的糖提取液至一個(gè)100ml容量瓶中,用蒸餾水定容,取2ml此稀釋的糖提取液至一個(gè)具有塞的比色管中,然后沿管壁緩緩注入蒽酮試劑0.5 ml,再緩慢地加入5ml濃H2SO4,加完后立即搖動(dòng)半分鐘,放入沸水浴中加熱10分鐘,取出后放入冷水中迅速冷卻,待10分鐘后,使之顯色穩(wěn)定,于620nm波長(zhǎng)光源下進(jìn)行比色,測(cè)的光密度。 3. 結(jié)果計(jì)算 根據(jù)光密度讀數(shù),自變準(zhǔn)曲線上查出含糖量(mg/L),然后代入下列公式中計(jì)算: 可溶性糖%(克/100克)=mg/L×100×50/5×10-6/樣品重×100 我用的鮮樣 出來(lái)結(jié)果也太大啦 都20%啦 一般鮮樣應(yīng)該在10%以內(nèi)的 跪求問(wèn)題出在哪里啊 ? |
銅蟲 (小有名氣)
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問(wèn)題可能出在你的樣品浸提過(guò)程: 【取新鮮甘薯樣品,擦凈表面污物,剪碎混勻,稱取2 g,放入帶刻度試管中,加入10mL 蒸餾水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液過(guò)濾入50mL容量瓶中,反復(fù)沖洗試管及殘?jiān),定容至刻度!糠磸?fù)沖洗試管及殘?jiān),是不是也進(jìn)到50 mL容量瓶了? 樣品測(cè)定前,吸取5ml的糖提取液至一個(gè)100ml容量瓶中定容。,然后取2 mL進(jìn)行測(cè)定。 待測(cè)液中不能有顆粒雜質(zhì),如果待測(cè)液不澄清,對(duì)比色結(jié)果影響非常大。浸提后你有沒(méi)有過(guò)濾或離心呢? |
銅蟲 (初入文壇)
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1、銅還原-直接滴定法(Lane-Eynon’s method), 用標(biāo)準(zhǔn)糖液滴定費(fèi)林試劑,得到費(fèi)林試劑與糖的相當(dāng)量,再用待測(cè)糖液滴定,用亞(次)甲基藍(lán)作指示劑。 適測(cè)范圍:含糖50mg/10~50ml糖待測(cè)液。 2、銅還原-高錳酸鉀容量法(Munson-Walker method), 還原糖與費(fèi)林試劑作用生成Cu2O↓,將Cu2O沉淀洗凈后,用Fe2(SO4)3溶解,生成FeSO4,用標(biāo)準(zhǔn)的高錳酸鉀溶液滴定生成的Fe2+,求得還原糖消耗的費(fèi)林試劑量,進(jìn)而計(jì)算出還原糖的含量。 適測(cè)范圍:含糖50~80mg/20ml糖待測(cè)液 3、費(fèi)(斐)林-碘量法, 費(fèi)林酸鈉滴定,根據(jù)費(fèi)林試劑的消耗量計(jì)算糖試劑與糖反應(yīng)生成糖酸和Cu2O↓,剩余的費(fèi)林試劑中的Cu2+與I-反應(yīng),生成I2;用硫代硫的含量。 適測(cè)范圍:含糖2~20mg/5~10ml糖待測(cè)液。 4、夏費(fèi)-索姆吉法(Shaller-Somogyi’s method),又稱為銅還原-碘量法, 利用糖與費(fèi)林試劑作用生成Cu2O↓,碘化鉀與碘酸鉀作用生成I2,溶液酸化后,Cu2O溶解出的Cu+與碘反應(yīng)消耗一部分I2,剩余的碘用硫代硫酸鈉溶液滴定;為防治Cu2+在酸性條件下氧化I-生成I2干擾測(cè)定,在加入碘化鉀的同時(shí)加入草酸,將其除去。 適測(cè)范圍:含糖0.5~2.5mg/5ml糖待測(cè)液。 5、氰化鹽-碘量法, 鐵氰化鉀與還原糖反應(yīng),被還原為亞鐵氰化鉀,剩余的鐵氰化鉀用碘量法測(cè)定(鐵氰化鉀在酸性條件下氧化I-生成I2,用硫代硫酸鈉滴定)。 適測(cè)范圍:含糖1~15mg/10ml糖待測(cè)液。 |
木蟲 (小有名氣)
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