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混水小蟲金蟲 (小有名氣)
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[求助]
分步雙酶切
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對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行Hind III 和Sal I雙酶切，因兩個(gè)酶切位點(diǎn)離的太近（中間10個(gè)bp），請(qǐng)問是否應(yīng)該采用分步酶切啊？ 還有就是如果采用雙酶切，這兩個(gè)酶的酶切順序如何確定啊？ 在第一次酶切后，是不是必須要進(jìn)行去磷酸化處理？看到之前的帖子上，說關(guān)于分步酶切中間的純化步驟中，很多同學(xué)都沒有說去磷酸化處理這個(gè)環(huán)節(jié)，是不是這一環(huán)節(jié)可以省略��？ 純化方法哪個(gè)較好些��？有些同學(xué)說是要電泳再割膠回收，有的說不電泳直接乙醇沉淀法回收，也有的人說不電泳直接加入溶膠buffer，開始回收！ 請(qǐng)熟知這一方面的大蝦給點(diǎn)幫助吧！ |
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Marado
金蟲 (正式寫手)
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9樓2012-11-30 09:46:22
2樓2012-11-29 21:58:32
ben1147
木蟲 (正式寫手)
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3樓2012-11-29 22:35:54
gyesang
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4樓2012-11-29 22:41:57
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