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[求助]
關(guān)于鎳柱純化,急求,!!
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真是太怪異了。 我用大腸桿菌表達了一個可溶性蛋白,經(jīng)質(zhì)粒測序,序列都是沒問題的,,這個可溶性蛋白我用鎳柱純化,,細菌破碎后,,上清液我過鎳柱,,經(jīng)過淋洗后用高濃度咪唑洗脫,洗脫下來后濃縮,,然后SDS-PAGE檢測,,發(fā)現(xiàn) 沒有我的目的蛋白,而是大腸桿菌自身蛋白,,這是怎么回事? 這個情況我碰到兩次了,,上次一個蛋白也是這種情況,,用鎳柱純化的蛋白不是我的目的蛋白,,,真是怪異,,急求。! |
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