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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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mengpei

金蟲 (小有名氣)

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[求助] 急！求助southern blot相關(guān)問(wèn)題

做了好久Southern blot ，但一直沒(méi)有結(jié)果，真的很急，請(qǐng)高手指點(diǎn)一下。
用質(zhì)粒做對(duì)照，質(zhì)粒上有很清楚的帶，但植物基因組上仍然沒(méi)有帶，目標(biāo)片段700bp左右，探針310bp�；蚪M酶切后PCR可以擴(kuò)增到目標(biāo)片段，酶切也很充分。謝謝！

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1樓 2013-01-06 23:06:13

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lostdipper

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【答案】應(yīng)助回帖

這可能是你樣品的問(wèn)題，目的片段拷貝數(shù)高么，如果低拷貝建議你提些DNA，多選幾株，另外你的700bp在雜交結(jié)果上不一定是700吧？難道你在這個(gè)片段兩端酶切的？

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4樓2013-01-10 09:14:15

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cicelyzh

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

是上樣量的問(wèn)題嗎？質(zhì)粒樣品的基因拷貝數(shù)肯定比基因組高的，試試做幾個(gè)不同上樣量看看。

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2樓2013-01-07 03:05:30

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Fleaves

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孟佩，來(lái)這求助了？字?jǐn)?shù)不夠不讓發(fā)

[ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ]

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3樓2013-01-08 12:24:19

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mengpei

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4樓: Originally posted by lostdipper at 2013-01-10 09:14:15
這可能是你樣品的問(wèn)題，目的片段拷貝數(shù)高么，如果低拷貝建議你提些DNA，多選幾株，另外你的700bp在雜交結(jié)果上不一定是700吧？難道你在這個(gè)片段兩端酶切的？

DNA就是煙草的基因組，用ECRO1酶切的，不是目標(biāo)片段兩端，你的意思是提高DNA的質(zhì)量？

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5樓2013-01-10 16:04:16

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