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[交流]
westen blot怎么轉(zhuǎn)都轉(zhuǎn)不上，求助
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目標(biāo)蛋白分子量時(shí)14kd和25kd，bio-rad濕轉(zhuǎn)，0.22um的pvdf膜，總蛋白濃度是0.2mg/mL，上樣量做過10ul，20ul。濕轉(zhuǎn)條件是200mA，時(shí)間分別做過1h，1.5h和2h，但是marker每次都能很好的轉(zhuǎn)到膜上，但是樣品用麗春紅染色后發(fā)現(xiàn)膜上沒有蛋白條帶。 ps:我在考慮是不是蛋白濃度太低了，水解了？看了一些資料，資料上說一般一個(gè)泳道的上樣量在30ug-100ug的蛋白量。求大家?guī)兔纯次疫@個(gè)實(shí)驗(yàn)！謝謝 |
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