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westen blot怎么轉(zhuǎn)都轉(zhuǎn)不上,求助
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目標蛋白分子量時14kd和25kd,bio-rad濕轉(zhuǎn),0.22um的pvdf膜,總蛋白濃度是0.2mg/mL,上樣量做過10ul,20ul。濕轉(zhuǎn)條件是200mA,時間分別做過1h,1.5h和2h,但是marker每次都能很好的轉(zhuǎn)到膜上,但是樣品用麗春紅染色后發(fā)現(xiàn)膜上沒有蛋白條帶。 ps:我在考慮是不是蛋白濃度太低了,水解了?看了一些資料,資料上說一般一個泳道的上樣量在30ug-100ug的蛋白量。求大家?guī)兔纯次疫@個實驗!謝謝 |
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