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hyacinth326金蟲 (正式寫手)
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[求助]
構(gòu)建載體中遇到問題，請(qǐng)大家多多指教
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| 我想構(gòu)建一個(gè)載體用于自己的實(shí)驗(yàn)，這個(gè)載體的復(fù)制子和復(fù)制蛋白來源于pKD46質(zhì)粒，而抗性基因，蔗糖致死篩選標(biāo)記和多克隆位點(diǎn)來源于另外的質(zhì)粒pEX18Tc，復(fù)制子那一段長(zhǎng)度為1600多bp，抗性基因那一段5000多bp，可是現(xiàn)在我構(gòu)建了三個(gè)多月了仍然沒有構(gòu)建成功，我用的是NcoI和XhoI這兩個(gè)內(nèi)切酶，求高手指點(diǎn)一下我哪個(gè)地方有問題吧，我個(gè)人感覺應(yīng)該不是酶切連接轉(zhuǎn)化的問題，但是又找不出原因來，我會(huì)將我兩個(gè)載體選取的區(qū)域附在下面，請(qǐng)大家?guī)臀铱匆幌率欠裼袉栴}。 |
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ccharlien
木蟲 (正式寫手)
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2樓2013-01-10 05:59:33
stardu
新蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 微生物遺傳育種學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
你好！你的這個(gè)我不清楚，你上次回答過我提的替換pKD46上抗性的問題，我還是沒有最終連接上。之后我又追問了幾個(gè)問題你可能沒看到，你能去我的那個(gè)帖子回答一下么？萬分感謝你！下面是網(wǎng)址： " target="_blank">http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=5361486![](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/hand.gif\") |
3樓2013-01-10 09:02:11
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