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zhouni923219銅蟲 (正式寫手)
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[求助]
畢赤酵母重組子的篩選
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| 各位大蝦們好，我做的是畢赤酵母，由于轉(zhuǎn)化時載體片段越大就越難整合，但是我又不想用pPICZα載體，所以我想用對pPIC9K載體進行改造，將他縮小，His基因很大，可不可以將His去掉，宿主菌不用組氨酸缺陷型，直接利用G418抗性篩選重組子呢？請求各位知道。 |
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2樓2013-01-23 11:31:08
zhouni923219
銅蟲 (正式寫手)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 489.9
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- 蟲號: 1929540
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- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
3樓2013-01-23 15:43:50
【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zhouni923219: 金幣+5, 謝謝您 2013-01-24 10:34:22
laozuzunzhe: 金幣+5, good! 2013-01-25 09:26:26
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| pPICZa載體轉(zhuǎn)化后沒有組氨酸抗性轉(zhuǎn)化得到的重組菌落直接進行誘導表達，如果pPIC9K載體去掉His，理論上轉(zhuǎn)化子會很少，不利于后期篩選高拷貝重組子 |
4樓2013-01-24 09:09:23
5樓2013-02-18 11:48:05
zhouni923219
銅蟲 (正式寫手)
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6樓2013-02-26 10:55:34
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